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一、細胞特性

1. 細胞名稱：NFS-60細胞
2. 形態(tài)：淋巴母細胞樣，懸浮生長
3. 含量：>1x10⁶ 個/瓶
4. 污染：支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性
5. 規(guī)格：T25瓶或者1mL凍存管包裝

二、細胞接收后的處理：
1、貼壁細胞

1. 收到T25方瓶細胞后，請檢查是否漏液，如果漏液，請拍照片發(fā)給我們（凍存管細胞收到后直接37℃水浴復蘇或直接放置于液氮中長期儲存）。
2. 請先在顯微鏡下確認細胞生長狀態(tài)，去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h。
3. 棄去T25瓶中的培養(yǎng)基，換用新鮮的*培養(yǎng)基。
4. 如果細胞長滿（90%以上）請及時進行細胞傳代。
5. 接到細胞次日，請檢查細胞是否污染，若發(fā)現(xiàn)污染或疑似污染，請及時與我們?nèi)〉寐?lián)系。

2、懸浮細胞

1. 收到細胞后，請檢查是否漏液，如果漏液，請拍照片發(fā)給我們。
2. 請先在顯微鏡下確認細胞生長狀態(tài)，去掉封口膜并將15ml離心管置于37℃培養(yǎng)約2-3h。
3. 1200rpm離心5min，棄去15ml離心管中的培養(yǎng)基，細胞沉淀用新鮮的*培養(yǎng)基重懸并培養(yǎng)。
4. 如果細胞長滿（90%以上）請及時進行細胞傳代。
5. 接到細胞次日，請檢查細胞是否污染，若發(fā)現(xiàn)污染或疑似污染，請及時與我們?nèi)〉寐?lián)系。

                      
本公司的細胞培養(yǎng)操作規(guī)程，供參考
一、NFS-60細胞培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：

1. 準備RPMI-1640培養(yǎng)基，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%；15ng/mL G-CSF；1% P/S。
2. 培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3. 凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。

二、細胞處理：

1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。

2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。

   對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：

1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化2-3分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3ml此細胞的培養(yǎng)基終止消化。
3. 輕輕吹打后吸出，移入15ml離心管中，在1200RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 移入到事先準備好的含有5ml培養(yǎng)基的T-25培養(yǎng)瓶中或含有14ml培養(yǎng)基的T-75培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)。

3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時，先要消化處理并進行細胞計數(shù)。消化方法按照細胞傳代方法的1-3步驟進行，后的重懸液使用血清。懸浮細胞直接計數(shù)后離心，用血清重懸浮，加DMSO至終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X10⁶個細胞凍存。

注意事項：
1. 收到凍存管細胞后，若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染，請立即與我們聯(lián)系。
2. 所有動物細胞均視為有潛在的生物危害性，必須在二級生物安全臺內(nèi)操作，并請注意防護，所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。
3. 細胞用途：僅供科研使用。

發(fā)貨方式：
復蘇后發(fā)貨：我們復蘇細胞后發(fā)貨，貨期一周左右，免運費。（氣溫較好建議復蘇后發(fā)貨）
凍存發(fā)貨(干冰運輸）：需額外增加干冰運費，選擇干冰運輸?shù)奈覀儼l(fā)兩管細胞，為了保證客戶接種可靠性多發(fā)一管。（氣溫低于0℃須凍存發(fā)貨）
細胞發(fā)貨采取專業(yè)的運輸包裝，并選擇快捷的運輸方式（順豐速運或其他空運快遞）
本公司細胞引種來源：ATCC、DSMZ、ECACC、武大細胞庫、上海生化細胞所、*典型培養(yǎng)物保藏委員會等。

公司簡介：
    無錫欣潤生物科技有限公司是一家致力于為藥物公司、衛(wèi)生防疫機構和科研院所提供符合GLP標準規(guī)范的細胞系、原代細胞及體外藥物代謝和藥物間相互作用評價的產(chǎn)品公司，并提供以原代細胞為中心的體外藥物篩選相關技術服務的生物高科技企業(yè)。
    公司擁有多項*成熟的原代細胞分離培養(yǎng)技術，其中肝臟類細胞、成年鼠心肌細胞、血管內(nèi)皮細胞、神經(jīng)細胞、胰島細胞、小鼠骨髓間充質(zhì)干細胞、肝S9和肝微粒體等特色產(chǎn)品及相關服務獲得眾多合作伙伴的*。
    公司始終以“專注產(chǎn)品，用心服務”為核心價值，致力于打造原代細胞分離培養(yǎng)品牌，為各類藥物研發(fā)機構提供細胞生物學方面的高質(zhì)量產(chǎn)品和優(yōu)質(zhì)服務。