酶聯免疫試劑盒是酶免疫測定技術中應用廣的技術。其基本方法是將已知的抗原或抗體吸附在固相載體 ( 聚苯乙烯微量反應板 ) 表面,使酶標記的抗原抗體反應在固相表面進行,用洗滌法將液相中的游離成分洗除。
酶聯免疫試劑盒主要有:1)自身免疫檢測試劑盒,包括ELISA和IFA類診斷試劑;2)細胞因子ELISA試劑盒,包括人、大鼠、小鼠、兔、狗、羊、猴子、豬、豚鼠、馬類血清、尿、細胞培養上清液檢測試劑盒;3)流式細胞儀用試劑類,包括CD系列、細胞因子系列等;4)乳膠手工及上機試劑,包括透光比濁檢測試劑;5)內分泌檢測試劑盒,包括微色譜柱類檢測試劑;6)腫瘤標記物檢測試劑;7)微生物傳染病檢測試劑,包括性病類及其它傳染病類檢測試劑;8)實驗室儀器類,包括BTS-330大屏幕半自動生化分析儀、MiniNeph微量蛋白散色比濁儀及相關試劑;9)pcr及相關試劑;10)肝纖維化檢測;(11)單克隆抗體;(12)ELISPOT:細胞因子的全新解決方案;(13)特種蛋白;14)微色譜柱;(15)優生優育TORCH;16)生化試劑;17)抗體;18)細胞株;19)其它分子生物學研究用試劑。
標本的采集及保存:
1. 血清:全血標本請于室溫放置2小時或4℃過夜后于1000g離心20分鐘,取上清即可檢測,或將標本放于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。
2. 血漿:可用EDTA或肝素作為抗凝劑,標本采集后30分鐘內于2 - 8°C 1000 g離心15分鐘,或將標本放于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。
3. 細胞培養物上清或其它生物標本:1000g離心20分鐘,取上清即可檢測,或將標本放于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。
樣本處理及要求:
1、血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。
仔細收集上清,保存過程中如出現沉淀,應再次離心。
2、血漿:應根據標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應該再次離心。
3、尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。
4、細胞培養上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。檢測細胞內的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融,以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
5、組織標本:切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備用。標本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
6、標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融.
7、不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。