詳細(xì)介紹
以下是Rosetta-gami(DE3)pLysS 感受態(tài)細(xì)胞品牌的訂購信息:
中文名稱:?Rosetta-gami(DE3)pLysS 感受態(tài)細(xì)胞品牌
包裝:100ul*10
分類:表達(dá)感受態(tài)細(xì)胞
Rosetta-gami(DE3)pLysS 感受態(tài)細(xì)胞品牌一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí),應(yīng)將細(xì)胞收集,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,吹打均勻后,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO搖勻后進(jìn)行凍存。
高錳酸鹽指數(shù)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)(COD(Mn):4.17mg/L) V
硒標(biāo)準(zhǔn)溶液(100mg/L,溶劑:水) Selenium standard 7782-49-2
鍶標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000μg/ml) Strontium standard 7440-24-6
硫酸根離子(SO42-)標(biāo)準(zhǔn)溶液(5000mg/L,溶劑:水) Sulfate Standard V
硅酸根標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000μg/ml) Silicic Standaard V
(La,Ce,Pr,Nd,Sm,Eu,Gd,Tb,Dy,Ho,Er,Tm,Yb,Lu,Y)多元素混合標(biāo)準(zhǔn)溶液(混標(biāo))(1000μg/ml) V
(La,Ce,Pr,Nd,Sm,Eu,Gd,Tb,Dy,Ho,Er,Tm,Yb,Lu,Y,Sc)多元素混合標(biāo)準(zhǔn)溶液(混標(biāo))(100μg/ml 介質(zhì)硝酸 2.0mol/L NE) V
(Al,Bi,Fe,Mn,Mo,Sb,Si,Ta,Ti,Zn,Zr)多元素混合標(biāo)準(zhǔn)溶液(混標(biāo))(100μg/ml) V
鈦標(biāo)準(zhǔn)溶液(100μg/ml) Titanium standard 7440-32-6
鎢標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000μg/ml,基體:0.1mol/LNaOH) Tungsten solution 7440-33-7
鉭標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000μg/ml) Tantalum standard 7440-25-7
碲標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000μg/ml) Tellurium standard 13494-80-9
鋱標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000μg/mL,基體:10%HCl) Terbium standard 7440-27-9
釩標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000μg/ml,溶劑:0.5mol/L HNO3) Vanadium solution 7440-62-2
釔標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000μg/ml in 10% HCl) Yttrium standard 7440-65-5
鋅標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000μg/ml,基體:1mol/L HNO3) Zinc standard 7740-66-6
鋅標(biāo)準(zhǔn)溶液(100μg/ml,,基體:1%HNO3) Zinc standard 7740-66-6人 IFNA2 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽 (密碼子優(yōu)化)
人 IFNA2 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶FLAG標(biāo)簽 (密碼子優(yōu)化)
人 TNFSF11 / CD254 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽 (密碼子優(yōu)化)
人 GM-CSF 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶FLAG標(biāo)簽
人 bFGF 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶FLAG標(biāo)簽 (密碼子優(yōu)化)
人 aFGF / FGF1 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽 (密碼子優(yōu)化)
人 aFGF / FGF1 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶FLAG標(biāo)簽 (密碼子優(yōu)化)
人 CD66e / CEACAM5 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽
狗 EGFR 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶His標(biāo)簽
人 GSTA1 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶FLAG標(biāo)簽
人 BRAF 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶His標(biāo)簽
人 EpCAM / TROP1 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶His標(biāo)簽
Rosetta-gami(DE3)pLysS 感受態(tài)細(xì)胞品牌甲型流感 H5N1 (A/Vietnam/1194/2004) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體)(密碼子優(yōu)化), 無標(biāo)簽
小鼠 PD1 / PDCD1 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶FLAG標(biāo)簽
人 TXN2 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽
人 TXN 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽
人 IDO1 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽
人 Klotho beta 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽
人 CCR5 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽
人 MCRS1 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶HA標(biāo)簽
收到Rosetta-gami(DE3)pLysS 感受態(tài)細(xì)胞品牌如何處理?
1、首先,觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有,請拍照,并及時(shí)與技術(shù)支持聯(lián)系(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù))。
2、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題,部分貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落;先不要打開培養(yǎng)瓶蓋,將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時(shí),以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
3、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如貼壁特性(貼壁/懸浮)、細(xì)胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后,取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶,鏡檢、拍照,記錄細(xì)胞狀態(tài)(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù));建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后,定期拍照、記錄細(xì)胞生長狀態(tài)。
5、貼壁細(xì)胞:若細(xì)胞生長密度超過80%,可正常傳代;若未超過80%,移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基,預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作,瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細(xì)胞:將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi),1200rpm離心5min,離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時(shí),若細(xì)胞密度超過80%,可將細(xì)胞懸液分至2個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng),補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml;若細(xì)胞密度未超過80%,將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時(shí)再進(jìn)行傳代操作。