本試劑盒采用競爭elisa方法,在微孔板包被有右旋糖酐偶聯抗原,加入右旋糖酐標準品或樣品,游離右旋糖酐與微孔條上預包被的右旋糖酐偶聯抗原互相競爭抗右旋糖酐抗體酶標記物,用 TMB 底物顯色,加入終止液后顏色由藍色變為黃色,用酶標儀在 450nm 波長下進行檢測,吸光值與樣品中右旋糖酐含量成反比,通過標準曲線計算樣品中右旋糖酐的含量。
操作步驟:
1.標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。
2.加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用。
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。
7.溫育:操作同3。
8.洗滌:操作同5。
9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘。
10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。
11. 測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止液后15分鐘以內進行。
客戶須知:
1、液體類標本(細胞培養上清、組織勻漿、血清、血漿、尿液、胸水、腹水、腦脊液等)。
2、樣本保存:請盡早檢測,2-8℃保存一天;需更長時間須冷凍(-20℃或-70℃)保存。如需周期收集樣本,請將樣本及時分裝標號后,置-20℃或-70℃保存;
3、請提前告訴我們:您樣本的種屬、樣本數量、待測指標及其他特殊要求。