目前關(guān)于農(nóng)藥殘留量的檢測方法主要有如下幾種:色譜法、光譜法、酶抑制法、免疫分析法和生物傳感器檢測法等。
1、色譜法:色譜法也叫色層法或?qū)游龇ǎ抢梦镔|(zhì)各組分在兩相間分配系數(shù)的不同,實(shí)現(xiàn)各組分分離的目的,并將待測濃度轉(zhuǎn)化為電信號記錄下來的方法。目前色譜法主要有氣相色譜法、高效液相色譜法、薄層色譜法、超臨界流體色譜法。
2、光譜法:光譜法是根據(jù)農(nóng)藥中的某些官能團(tuán)或水解、還原產(chǎn)物與特殊的顯色劑在特定的環(huán)境下發(fā)生氧化、磺酸化、脂化、絡(luò)合等化學(xué)反應(yīng),產(chǎn)生特定波長的顏色反應(yīng)來進(jìn)行定性或定量測定,也可以根據(jù)含氫基團(tuán)在近紅外光譜區(qū)的吸收來進(jìn)行測定。
3、酶抑制法:有機(jī)磷、氨基甲酸酯類農(nóng)藥進(jìn)入機(jī)體以后,與膽堿酯酶結(jié)合,形成了不易水解的磷酰化膽堿酯酶,喪失了水解乙酰膽堿的活力,如果大多數(shù)膽堿酯酶都轉(zhuǎn)變?yōu)橄喈?dāng)穩(wěn)定難以水解的磷酰化膽堿酯酶,乙酰膽堿就在體內(nèi)大量蓄積,產(chǎn)生遲發(fā)性神經(jīng)毒性使中樞神經(jīng)、交感神經(jīng)、運(yùn)動神經(jīng)和一些腺體首先興奮而活動增強(qiáng),引起運(yùn)動失調(diào)等,后轉(zhuǎn)入抑制和衰竭、癱瘓,甚至中毒死亡。有機(jī)磷、氨基甲酸酯類農(nóng)藥可以抑制乙酰膽堿酯酶的活性,使其分解乙酰膽堿的速度變慢或停止。酶抑制法的原理是利用這一反應(yīng)特性,用濾紙片或電極作為載體,將乙酰膽堿酯酶吸附在上面,加入顯色劑,如果酶的活性沒有被抑制,則生成的產(chǎn)物可以使顯色劑顯色,如果被測樣品中含有農(nóng)藥殘留,則酶活性被抑制不能生成水解產(chǎn)物,顯色劑不顯色,根據(jù)顏色的變化或測定酶與某種特定化合物反應(yīng)的物理化學(xué)信號的變化,可判斷是否存在有機(jī)磷及氨基甲酸酯類農(nóng)藥。酶抑制法大的優(yōu)點(diǎn)是前處理簡單、檢測時間短、不需昂貴的儀器、易于掌握推廣,特別適合現(xiàn)場檢測以及大批樣品的篩選。但是酶抑制法測定樣品和農(nóng)藥種類有限,目前只適用于蔬菜、水果中有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥的殘留檢測,并且該方法使用的酶、底物、顯色劑有一定的特異性,需控制的條件比較多,易出現(xiàn)假陽性或假陰性現(xiàn)象另外其靈敏度、重復(fù)性、回收率還有待提高。
4、酶聯(lián)免疫法:農(nóng)藥殘留免疫分析方法是以抗原與抗體的特異性結(jié)合為基礎(chǔ),把抗體作為生物化學(xué)檢測器對化合物、酶或蛋白質(zhì)等物質(zhì)進(jìn)行定性和定量分析的一門技術(shù)。按標(biāo)記抗原或抗體標(biāo)記物的不同可區(qū)分為放射免疫分析(RIA)法、酶免疫分析(EIA)法、熒光免疫分析(FIA)法等。由于保存期長、高敏感性、結(jié)果準(zhǔn)確且可進(jìn)行光譜分析等優(yōu)點(diǎn),使酶免疫分析法成為迄今為止農(nóng)藥殘留免疫檢測中應(yīng)用廣泛的一種免疫分析方法。
農(nóng)藥殘留檢測試劑盒原理說明:
在一定條件下,有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥對膽堿酯酶正常功能有抑制作用,其抑制率與農(nóng)藥的濃度呈正相關(guān)。正常條件下,膽堿酯酶(ChE)催化神經(jīng)傳導(dǎo)代謝產(chǎn)物類似物(碘化硫代乙酰膽堿ATCI或碘化硫代丁酰膽堿BTCI)水解,其水解產(chǎn)物與顯色劑(二硫代二硝基苯甲酸DTNB)發(fā)生反應(yīng),產(chǎn)生黃色物質(zhì),用分光光度計(jì)或農(nóng)殘測試儀在412nm處測定吸光度的變化值(△A),計(jì)算出抑制率可以判斷出樣品中是否有高劑量有機(jī)磷或氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留的存在。
農(nóng)藥殘留檢測試劑盒試劑和樣本的控制方法:
一、試劑
1.試劑的選擇:國家明確要求要采用批批檢定的形式對ELISA試劑嚴(yán)格把關(guān),我司嚴(yán)格按照進(jìn)行,已獲得國家承認(rèn)的“三證",每一個產(chǎn)品都有對應(yīng)的批號,只要客戶提前下單,我們就能為您提供新批次的產(chǎn)品,不必?fù)?dān)心會有過期的試劑。我司的試劑,值得您選擇。
2.試劑的準(zhǔn)備:先將試劑盒先從冰箱中拿出來,在室溫下放置20-30 min后,再進(jìn)行測定,使試劑盒在使用前與室溫平衡,這樣做的目的能使反應(yīng)微孔內(nèi)的溫度較快地達(dá)到所需的溫度,以滿足后面的測定需求。