農(nóng)藥殘留是指農(nóng)藥使用后殘存于環(huán)境、生物體和食品中的農(nóng)藥母體、衍生物、代謝物、降解物和雜質(zhì)的總稱(chēng)。目前農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)方法種類(lèi)繁多,究其原理來(lái)說(shuō)主要分為兩大類(lèi):生化測(cè)定法和色譜檢測(cè)法。其中生化測(cè)定法中的酶抑制率法由于具有快速、靈敏、操作簡(jiǎn)便、成本低廉等特點(diǎn),被列為標(biāo)準(zhǔn)方法(GB/T 5009、199-2003),已成為對(duì)果蔬中有機(jī)磷和氨基甲酸酯類(lèi)農(nóng)藥殘留進(jìn)行現(xiàn)場(chǎng)快速定性初篩檢測(cè)的主流技術(shù)之一,得到了越來(lái)越廣泛的應(yīng)用。
農(nóng)藥殘留檢測(cè)試劑盒采用競(jìng)爭(zhēng)elisa方法,在微孔板包被有右旋糖酐偶聯(lián)抗原,加入右旋糖酐標(biāo)準(zhǔn)品或樣品,游離右旋糖酐與微孔條上預(yù)包被的右旋糖酐偶聯(lián)抗原互相競(jìng)爭(zhēng)抗右旋糖酐抗體酶標(biāo)記物,用 TMB 底物顯色,加入終止液后顏色由藍(lán)色變?yōu)辄S色,用酶標(biāo)儀在 450nm 波長(zhǎng)下進(jìn)行檢測(cè),吸光值與樣品中右旋糖酐含量成反比,通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中右旋糖酐的含量。
農(nóng)藥殘留檢測(cè)試劑盒試劑和樣本的控制方法:
1、試劑的選擇:國(guó)家明確要求要采用批批檢定的形式對(duì)ELISA試劑嚴(yán)格把關(guān),我司嚴(yán)格按照進(jìn)行,已獲得國(guó)家承認(rèn)的“三證”,每一個(gè)產(chǎn)品都有對(duì)應(yīng)的批號(hào),只要客戶(hù)提前下單,我們就能為您提供新批次的產(chǎn)品,不必?fù)?dān)心會(huì)有過(guò)期的試劑。我司的試劑,值得您選擇。
2、試劑的準(zhǔn)備:先將試劑盒先從冰箱中拿出來(lái),在室溫下放置20-30 min后,再進(jìn)行測(cè)定,使試劑盒在使用前與室溫平衡,這樣做的目的能使反應(yīng)微孔內(nèi)的溫度較快地達(dá)到所需的溫度,以滿(mǎn)足后面的測(cè)定需求。
農(nóng)藥殘留檢測(cè)試劑盒操作步驟說(shuō)明:
1、標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋?zhuān)罕驹噭┖刑峁┰稑?biāo)準(zhǔn)品一支,用戶(hù)可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。
2、加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測(cè)樣品10μl(樣品終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。
3、溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4、配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用。
5、洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿(mǎn)洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。
6、加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。
7、溫育:操作同3。
8、洗滌:操作同5。
9、顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘。
10、 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
11、 測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以?xún)?nèi)進(jìn)行。