農藥殘留檢測試劑盒概述
實驗原理:
本試劑盒采用競爭elisa方法,在微孔板包被有右旋糖酐偶聯抗原,加入右旋糖酐標準品或樣品,游離右旋糖酐與微孔條上預包被的右旋糖酐偶聯抗原互相競爭抗右旋糖酐抗體酶標記物,用 TMB 底物顯色,加入終止液后顏色由藍色變為黃色,用酶標儀在 450nm 波長下進行檢測,吸光值與樣品中右旋糖酐含量成反比,通過標準曲線計算樣品中右旋糖酐的含量。
技術交流:
樣品收集、處理及保存 | 操作步驟 |
1. 細胞培養上清:適用于檢測體外培養的細胞分泌性成份。用無菌管收集細胞上清液,以1000×g離心15分鐘,收集上清。 2. 細胞:用PBS反復洗滌細胞3次,調整細胞濃度達到104 -106/ml 左右,通過反復凍融,使細胞破壞并放出細胞內成份,或者細胞超聲粉碎,離心取上清液檢測。 3. 血清:在室溫下,血液自然凝固,以1000×g離心15分鐘,取上清待測。 4. 血漿:應根據標本的要求選擇EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合后靜置10-20 分鐘后,以1000×g離心15分鐘,收集上 清。 5. 體液:包括胸腹水、腦脊液,分泌物等。使用不含熱原和內毒素的離心管收集,以1000×g離心15分鐘,收集上清。 6. 組織標本:切取組織標本,稱取重量0.5mg,加入500ul 的PBS,用手工或勻漿器,或超聲破碎儀將標本勻漿,以2000-3000 rmp離心20 分鐘,收集上清進行檢測。 7. 樣品中不能含有NaN3,因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。 8. 保存:如果樣品不能立即檢測,應將其分裝,-70 ℃保存,避免反復冷凍。保存過程中如出現沉淀,應再次離心。血液標本盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。 | 1.標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。 2.加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。 3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。 4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用。 5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。 6.加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。 7.溫育:操作同3。 8.洗滌:操作同5。 9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘。 10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。 11. 測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止液后15分鐘以內進行。 |
客戶須知:
1、液體類標本(細胞培養上清、組織勻漿、血清、血漿、尿液、胸水、腹水、腦脊液等)。
2、樣本保存:請盡早檢測,2-8℃保存一天;需更長時間須冷凍(-20℃或-70℃)保存。如需周期收集樣本,請將樣本及時分裝標號后,置-20℃或-70℃保存;
3、請提前告訴我們:您樣本的種屬、樣本數量、待測指標及其他特殊要求。
承諾:
1.有質量問題免費包換,合同上注明了的.(質量問題包括運輸不當,客戶在使用過程中測不出結果,等等!)
2.全程技術指導。(包括售前的標本收集,使用過程中不明白的地方,實驗結束后的數據分析,有任何疑問,我們技術都會即時給你去電)
3.提供免費代測的服務。(你只需把標本寄過來,我們為你節省時間,幫你出結果,原始數據,分析數據均可提供,一般時間是5天左右)
4.客戶有任何問題,我們都是在一個工作日之內給出解決方案。售后和技術這一塊都是竭誠為客戶服務。