詳細介紹
試劑的組成和配制:
提取液:液體 100mL×1 瓶,4℃保存;
試劑一:液體 5mL×1 瓶,4℃保存;
試劑二:液體 200μL×1 支,4℃保存;
試劑三:液體 4mL×1 瓶,4℃保存;
試劑四:粉劑×2 瓶,4℃保存。
產品簡介:
產品名稱:植物果糖-1,6-二磷酸(酯)酶(FBP)試劑盒科研
規格:48樣 96樣
貨號:AS234
檢測方法:可見分光光度法 微板法
產品分類:光合作用系列
貯存溫度:2~8℃。
本試劑盒保質期:6個月。本產品僅用于科研實驗。
所需的儀器和用品:
可見分光光度計、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、低溫離心機、移液器、研缽、冰和蒸餾水
四、超氧化物歧化酶(SOD)的測定:
建議正式實驗前選取 2 個樣本做預測定,了解本批樣品情況,熟悉實驗流程,避免實驗
樣本和試劑浪費!
1、樣本制備
① 組織樣本:
取約 0.1g 組織(水分充足的樣本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4oC 或冰浴進行
勻漿(或使用各類常見勻漿器)。4oC×12000rpm 離心 10min,取上清作為待測液。
【注】:若增加樣本量,可按照組織質量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例進行提取
② 細菌/細胞樣本:
先收集細菌或細胞到離心管內,離心后棄上清;取約 500 萬細菌或細胞加入 1mL
提取液,超聲波破碎細菌或細胞(冰浴,功率 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復 30 次);
12000rpm 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。
【注】:若增加樣本量,可按照細菌/細胞數量(10
4):提取液(mL)為 500~1000:1 的比例進行提取。 ③ 液體樣本:直接檢測;若渾濁,離心后取上清檢測。
Rabbit anti-MG IgG/Gold 膠體金標記的兔抗爪沙鼠IgG 規格: 0.5ml
CHDH/Choline dehydrogenase 脫抗體 規格: 0.2ml
CABLES2 細胞周期依賴性激CABLES2抗體 規格: 0.2mlGentamicin 慶大霉抗體 規格: 0.2ml
C12ORF4 12號染色體開放閱讀框4抗體 規格: 0.2ml
Donkey Anti-Guinea pig IgG/Gold 膠體金標記的驢抗豚鼠IgG 規格: 0.5ml
Claudin 3 緊密連接3抗體 規格: 0.1ml
Phospho-CEBP beta (Ser105) 磷化轉錄調節因子CEBP β抗體 規格: 0.1mlC12ORF68 12號染色體開放閱讀框68抗體 規格: 0.2ml
PDSS2 抑DLP1抗體 規格: 0.2ml
Rabbit Anti-mouse IgM/FITC FITC標記的兔抗小鼠IgM 規格: 0.3ml
CD8 alpha CD8抗體 0.1mlBAI1 腦特異性管生成抑制1抗體 規格: 0.2ml
OPCML 樣物質結合/細胞粘附分子樣抗體 規格: 0.1ml
植物果糖-1,6-二磷酸(酯)酶(FBP)試劑盒科研聚糖鄰氨基吡啶(2-AP)熒光標記試劑盒 20次
聚糖二氨基亞甲基二氧基苯(DMB)熒光標記試劑盒 20次
氨基卞三磺酸(ANTS)熒光輔助糖蛋白電泳(FACE) 5次
檢測試劑盒
鄰氨基卞啶酮(AMAC)熒光輔助糖蛋白電泳(FACE) 5次
檢測試劑盒
糖蛋白膠回收試劑盒 20次
糖蛋白標準樣品——辣根過氧化酶 1毫克
標記二抗(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠) 100微升
FITC標記二抗(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠) 100微升
操作步驟:
實驗開始前,各試劑均應平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時,均需混勻,混勻時盡量避免起泡。實驗前應預測樣品含量,如樣品濃度過高時,應對樣品進行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍,計算時再乘以相應的稀釋倍數。
1. 加樣:分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl,余孔分別加標準品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標板加上蓋或覆膜,37℃反應120分鐘。為保證實驗結果有效性,每次實驗請使用新的標準品溶液。
2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl(在使用前一小時內配制),酶標板加上覆膜, 37℃反應60分鐘。
3. 溫育60分鐘后,棄去孔內液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內液體拍干)。
4. 每孔加檢測溶液B工作液(同檢測A工作液) 100μl,酶標板加上覆膜37℃反應60分鐘。
5. 溫育60分鐘后,棄去孔內液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內液體拍干)。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶標板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內,此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應,此時藍色立轉黃色。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結果的準確性,底物反應時間到后應盡快加入終止液。
8. 用酶聯儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。在加終止液后立即進行檢測。