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ELISA酶聯接免疫吸附劑測定基本類型簡述
閱讀：281 發布時間：2024-8-5ELISA是酶聯接免疫吸附劑測定(Enzyme-LinkedImmunosorbnentAssay)的簡稱。它是繼免疫熒光和放射免疫技術之后發展起來的一種免疫酶技術。此項技術自70年代初問世以來，發展十分迅速，目前已被廣泛用于生物學和醫學科學的許多領域。
ELISA是以免疫學反應為基礎，將抗原、抗體的特異性反應與酶對底物的高效催化作用相結合起來的一種敏感性很高的試驗技術。
由于抗原、抗體的反應在一種固相載體──聚苯乙烯微量滴定板的孔中進行，每加入一種試劑孵育后，可通過洗滌除去多余的游離反應物，從而保證試驗結果的特異性與穩定性。在實際應用中，通過不同的設計，具體的方法步驟可有多種。即:用于檢測抗體的間接法、用于檢測抗原的雙抗體夾心法以及用于檢測小分子抗原或半抗原的抗原競爭法等等。比較常用的是ELISA雙抗體夾心法及ELISA間接法。
ELISA可用于測定抗原，也可用于測定抗體。這種測定方法中有3種必要的試劑：
固相的抗原或抗體；
2.酶標記的抗原或抗體；
3.酶作用的底物。
根據試劑的來源和標本的性狀及檢測的具備條件，可設計出各種不同類型的檢測方法。
1.雙抗體夾心法測抗原
針對抗原分子上兩個不同抗原決定簇的單克隆抗體分別作為固相抗體和酶標抗體。適用于測定二價或二價以上的大分子抗原，不適用于測定半抗原及小分子單價抗原，因其不能形成兩位點夾心。
2.競爭法測抗原
首先將特異性抗體包被于固相載體表面，經洗滌后分成兩組：一組加酶標記抗原和被測抗原的混合液，另一組只加酶標記抗原，經孵育洗滌后加底物顯色，這兩組底物降解量之差，即為所要測定的未知抗原的量。此方法測定的抗原只要有一個結合部位即可，對小分子抗原如激素和藥物類的測定常用此法。優點是快，缺點是需要較多量的酶標記抗原。
3.免疫抑制法測抗原
被檢標本對底物顯色的抑制程度與標本中所含抗原的量成正比，二者之差即為預測抗原的量。
4.間接法測抗體
是檢測抗體很 常用的方法，原理為利用酶標記的抗抗體以檢測已與固相結合的受檢抗體。
本法只要更換不同的固相抗原，可以用一種酶標抗體檢測各種與抗原相應的抗體。主要用于對病原體的檢測而進行傳染病的診斷。