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什么是胎牛血清?
胎牛血清(fetal bovine serum,FBS)指通過對未出生的胎牛行穿刺采血,再經自然層析、離心、三級0.1µm微濾等處理而得到的上清液。
胎牛血清的生產流程
首先甄選符合要求的高質量的供體,將胎牛從母體內取出,對胎牛進行穿刺取血,采血過程中要保證無菌操作,且紅細胞不可破裂過多,影響血清質量。接下來冷凍離心,收集血清,凍存,血清解凍后進行0.1um三次過濾,避免病原微生物的污染,此過程之后會對血清進行質檢和定級,最后全程冷鏈保存和運輸。
胎牛血清的主要成分
①各種蛋白:白蛋白、球蛋白、纖連蛋白、轉鐵蛋白等;
②因子:各種生長因子等;
③各種激素:胰島素、促生長激素等;
④其他微量元素、維生素、離子等;
⑤不明確的成分:由于胎牛血清是天然生物制品,FBS中還存在部分不明確的生物成分。
胎牛血清的主要功能
①提供營養
胎牛血清中的各種蛋白可提供細胞分裂所需的營養物質
②促進生長
胎牛血清中的各種生長因子和激素可促進細胞生長
③保護細胞
胎牛血清帶有一定粘稠度,且有酸堿緩沖液的作用,可保護細胞
④提供蛋白酶抑制劑
提供蛋白酶抑制劑,中和剩余的胰蛋白酶的消化,保護細胞
⑤提供貼壁因子
胎牛血清提供貼壁因子,是細胞貼壁、鋪展在塑料培養基質上所需因子的來源。
胎牛血清使用要點
①正確地儲存
胎牛血清應在-20°C長期保存,如在4℃保存,不應超過1個月。在使用時注意分裝使用。避免反復凍融。
② 正確地解凍
可在4℃冰箱過夜解凍。推薦使用血清融化三步法:即將500ml血清在室溫下放置1.5h,20℃水浴25min,37℃ 水浴35min。
③正確地使用
配制培養基盡可能“現用現配",并于一周內用完。避免胎牛血清在37°C靜置過久。
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