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微生物培養基原料-膽鹽簡介
膽鹽(Bile salt)是由肝細胞分泌的膽汁酸與甘氨酸或?;撬峤Y合而形成的鈉鹽或鉀鹽,為白色或淡黃色粉末,是細菌培養基中常用的選擇性抑制劑。它由動物膽汁中提取,膽汁存在于動物膽囊中,含有膽色素、膽汁酸鹽、粘朊、核蛋白、真脂、磷脂、膽汁酸、膽固醇、微量磷酸酶和各種無機離子。實驗室常用膽鹽類產品有:牛膽鹽、豬膽鹽、三號膽鹽、五號膽鹽、七號膽鹽、脫氧膽酸鈉、牛膽酸鈉等。
膽鹽是由膽汁酸、結合膽酸類和膽汁醇類組成,其含量隨動物的種屬及貯存而變化。牛羊膽汁主要含膽酸和脫氧膽酸;兔膽汁主要含脫氧膽酸和少量膽酸;家禽膽汁主要含鵝脫膽汁酸和少量膽酸。
膽鹽對革蘭氏陽性桿菌有較強的抑制能力,而對革蘭氏陰性菌只有輕微的抑制能力。膽鹽之所以有抑菌能力,是由于它具有降低表面張力,使細菌的細胞膜損壞或菌體裂解,因而對某些細菌有溶菌作用。
在建國初期,我國使用的膽鹽均由國外進口。隨著科學研究、醫藥衛生事業的發展,膽鹽需要量迅速增加。我國許多學者自50年代起就開始研制,并很快形成實驗室規模的小量生產。梁植權于1955年發表文章,已研制成混合膽鹽。以后,上海市衛生防疫站用沉降法試制出膽鹽,王世明、鮑春榮又進行了改進。鄭翼宗研制了透析膽鹽,張寶銘試制去氧膽酸鈉,張穎悟制備的混和膽鹽以及中國藥品生物制品鑒定所的生檢NO.7膽鹽;上海醫學化驗所得NO.3、NO.5;武漢第二生化制藥廠的武漢膽鹽等的研制成功,為我國大量生產與進一步發展奠定了基礎。目前北京普納德科技有限公司作為培養基原材料供應商,常用的膽鹽都有供應。
在2015版《中國藥典》公式稿1101無菌檢查法和1106非無菌產品微生物限度檢查:控制菌檢查法中涉及到多種含膽鹽的培養基,如下表所示。
藥典培養基名稱 | 膽鹽種類 | 含量(g/L) |
腸道菌增菌液體培養基 | 牛膽鹽 | 20.0 |
紫紅膽鹽葡萄糖瓊脂培養基 | 脫氧膽酸鈉 | 1.5 |
麥康凱液體培養基 | 牛膽鹽 | 5.0 |
麥康凱瓊脂培養基 | 脫氧膽酸鈉 | 1.5 |
木糖賴氨酸脫氧膽酸鈉瓊脂培養基 | 脫氧膽酸鈉 | 2.5 |
膽鹽的質量規格標準如下(參見《微生物培養基質控與圖解》):
(一)理化檢驗方法及指標
1. 溶解度;1%的本品水溶液應*溶解,澄清透明不得有異物。
2. pH值(1%):7.5~8.5
3. 膽酸汁開始沉淀時的pH值:6.0~6.5
4. 酸值:128~145
5. 膽汁酸含量:65%左右,測定膽酸和去氧膽酸采用薄層色譜、高效液相色譜分析法及比色法。
6. 灰分:17%以下
7. 干燥失重:5%以下
8. 重金屬:20ppm以下
(二)細菌學檢驗方法及指標
用0.85%本品配制成SS瓊脂平板培養基,腸道病原菌應具有特定的菌落形態特征。
菌名 | 菌號 | 生長情況 | 菌落特征 | 菌型 |
大腸埃希菌 | 44113 | 部分抑制 | 桃紅色 | S |
鼠傷寒沙門菌 | 50220 | 良好 | 中心黑色 | S |
福氏志賀菌 | 51573 | 良好 | 無色半透明 | S |