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分光光度計的基本工作原理

時間:2019/7/22閱讀:1776
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分光光度計的基本工作原理是基于物質對光(對光的波長)的吸收具有選擇性,不同的物質都有各自的吸收光帶,所以,當光色散后的光譜通過某一溶液時,其中某些波長的光線就會被溶液吸收。在一定的波長下,溶液中物質的濃度與光能量減弱的程度有一定的比例關系,即符合比爾定律。
T = I/Io lg(Io/I)=εcb
式中,T為透過率,Io為入射光強度,I為透射光強度,A為消光值(吸光度),ε為吸收系數,b為溶液的光徑長度,c為溶液的濃度。從以上公式可以看出,當入射光、吸收系數和溶液厚度一定時,透光率是根據溶液的濃度而變化的。
721型分光光度計的構造
721型分光光度計允許的測定波長范圍在360~800nm,其構造比較簡單,測定的靈敏度和精密度較高。因此,應用比較廣泛。
721型分光光度計的儀器構造見下圖。
從光源燈發出的連續輻射光線,射到聚光透鏡上,會聚后,再經過平面鏡轉角90°,反射至入射狹縫。由此入射到單色器內,狹縫正好位于球面準直物鏡的焦面上,當入射光線經過準直物鏡反射后,就以一束平行光射向棱鏡。光線進入棱鏡后,進行色散。色散后回來的光線,再經過準直鏡反射,就會聚在出光狹縫上,再通過聚光鏡后進入比色皿,光線一部分被吸收,透過的光進入光電管,產生相應的光電流,經放大后在微安表上讀出。
721型分光光度計的使用方法
①首先接通電源,打開電源開關1,指示燈亮,打開比色皿暗箱蓋8,預熱20分鐘。
②波長選擇旋鈕6,選擇所需的單色光波長,用靈敏度旋鈕2選擇所需的靈敏檔。
③放入比色皿,旋轉零位旋鈕5調零,將比色皿暗箱蓋合上,推進比色皿拉桿3,使參比比色皿處于空白校正位置,使光電管見光,旋轉透光率調節旋鈕4,使微安表9指針準確處于100%。按上述方法連續幾次調整零位和100%位,即可進行測定工作(儀器面板見 圖5-6)。
721型分光光度計使用和維護中應注意事項:
①連續使用儀器的時間不應超過2小時,hao是間歇0.5小時后,再繼續使用。
②比色皿每次使用完畢后,要用去離子水洗凈并倒置晾干后,存放在比色皿盒內。在日常使用中應注意保護比色皿的透光面,使其不受損壞或產生劃痕,以免影響透光率。
③儀器不能受潮。在日常使用中,應經常注意單色器上的防潮硅膠(在儀器的底部)是否變色,如硅膠的顏色已變紅,應立即取出烘干或更換。
④在托運或移動儀器時,應注意小心輕放。

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