1、注意正確地使用和存放色譜柱,不銹鋼柱色譜柱可選用以下的溶劑保存:正相柱用烴類溶劑,反相柱用甲醇,離子交換柱用水或甲醇/水。某些分析色譜柱要注意規定的保存條件。另外,要注意溶液的PH值,一般控制在PH2-8范圍內,其硅膠柱PH>8時會發生硅膠溶脫的情況,鍵合型柱PH<2時會發生鍵合相斷裂。
2、色譜柱污染后可采用合適的溶劑沖洗,使柱效再生。
⑴硅膠柱可以使用正庚烷、氯仿、乙酸乙酯、丙酮、乙醇和水按順序沖洗色譜柱,經過凈化的色譜柱必須進行水活化,即按上述相反的順序沖洗。柱再生時所需要的有機溶劑要嚴格進行脫水處理。
⑵反相柱可以用甲醇、氯仿、正庚烷沖洗,鍵合C18柱一般用甲醇沖洗,必要時可用0.5 M EDTA鈉鹽溶液沖洗,然后用水沖洗,以達到去除柱內鹽類。
⑶鍵合型的離子交換柱可以用緩沖溶液、水、甲醇沖洗。
3、對污染嚴重的色譜柱在沖洗無效時,需將柱內填料取出進行處理或更換新的填料,還可以用更換柱頭填料的方法即將柱頭入口處的被污染的填料取出,重新補裝和柱內同類型的填料,然后在改變柱流向進行再生。這種逆流再生柱的方法,可以救活大部分柱子。
4、注入色譜柱的溶劑、標液、樣品溶液都必須嚴格過濾,以去除雜質,防止堵塞色譜柱。當用反沖洗方法無效時,可將柱口過濾裝置取下,用弱酸溶液處理,去除污物或定期更換。
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