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全自動(dòng)凱氏定氮儀工作原理及使用說明
工作原理
樣品中含氮有機(jī)物經(jīng)濃硫酸加熱消解,硫酸使有機(jī)物脫水,然后有機(jī)物炭化生成碳,碳將硫酸還原為SO2,本身則變成CO2,SO2使N還原為NH3,本身則氧化為S2O3,而消化過程中生成的H2,又加速了NH3的形成。在反應(yīng)過程中,生成的H2O和S2O3溢出,而NH3則與H2SO4結(jié)合成(NH4)2SO4內(nèi)溶液中,加入NaOH,并蒸餾,使NH3溢出,用H3BO3吸收后,用已知摩爾濃度的酸滴定,測(cè)出樣品全氮含量,乘以氮與蛋白質(zhì)的換算系數(shù),即為粗蛋白質(zhì)的含量。
使用說明
1. 儀器和用具
1.1 分析天平:感量0.0001g
1.2 實(shí)驗(yàn)室用粉碎機(jī)或研缽
1.3 酸式滴定管:25ml或10ml
1.4 錐形瓶:容積250ml
1.5 分樣篩:孔徑0.45mm(40目)
2. 試劑
2.1 鹽酸(HCl):分析純(GB/T622-2006)0.05moI/L標(biāo)準(zhǔn)液,(4.2ml鹽酸,注入1000ml蒸餾水)碳酸鈉法標(biāo)定鹽酸。
2.2 氫氧化鈉(NaOH):化學(xué)純(GB/T629-1997),40g溶于蒸餾水中溶成100ml,配成40%水溶液(m/V)。
2.3 硼酸(H3BO3):分析純(GB/T628-2011)2g,溶于蒸餾水中配成100ml 2%水溶液(m/V)。
2.4 混合指示劑:溶液Ⅰ:準(zhǔn)確稱取0.1g溴甲酚綠(C21H14Br4O5S)(HG/T4017-2008),溶于95%乙醇,用95%乙醇稀釋至100 ml。
溶液Ⅱ:準(zhǔn)確稱取0.2g甲基紅(C15H15N3O2)(HG/T3449-2012),溶于95%乙醇,用95%乙醇稀釋至100ml。
取30 ml溶液Ⅰ、10mL溶液Ⅱ,混勻即可。陰涼處保存(保存期三個(gè)月以內(nèi))。
2.5 催化劑:硫酸銅(CuSO4·5H2O)分析純(GB/T665-2007)10g;硫酸鉀(K2SO4)(GB/T16496-1996)分析純150g,在研缽中研磨,仔細(xì)混勻過40目篩。
2.6 濃硫酸(H2SO4)化學(xué)純(GB/T625-2007)(含量98%、無氮)。
2.7 蒸餾水:為實(shí)驗(yàn)室用三級(jí)水、電導(dǎo)率(25℃,ms/m)≤0.50,電阻率(25℃,MΩ·cm)≥0.2
3. 樣品制備
3.1 選取有代表性的樣品,挑揀干凈,按四分法縮減取樣,粉碎至40目篩通過,裝于密封容器中。(取樣不少于200g)
3.2 液體試樣,必須有代表性,取樣后,先放在消化管內(nèi)濃縮至體積(三分之一)再加入其他試劑進(jìn)行消化。
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