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目錄:上海貝博生物科技有限公司>>細胞凋亡>>細胞凋亡檢測試劑盒>> BB-4101-100TAnnexin V-FITC / PI 細胞凋亡檢測試劑盒

Annexin V-FITC / PI 細胞凋亡檢測試劑盒
  • Annexin V-FITC / PI 細胞凋亡檢測試劑盒
參考價 1700
訂貨量 ≥1
具體成交價以合同協議為準
1700
≥1
具體成交價以合同協議為準
  • 品牌 貝博生物
  • 型號 BB-4101-100T
  • 廠商性質 生產商
  • 所在地 上海市
屬性

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更新時間:2024-11-13 21:28:12瀏覽次數:329評價

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供貨周期 現貨 規格 100T
應用領域 醫療衛生,化工,生物產業,綜合
Annexin V-FITC / PI 細胞凋亡檢測試劑盒用標記了FITC的AnnexinⅤ作為熒光探針,利用流式細胞儀或熒光顯微鏡可檢測細胞凋亡的發生。壞死的細胞會結合Annexin V-FITC。Propidium iodide(PI)是一種核酸染,它不能透過完整的細胞膜。

細胞凋亡是細胞的基本特征之一,它在機體的胚胎發育、組織修復、內環境的穩定和一些疾病發生過程等方面起著十分重要的作用。在正常細胞中,PS只分布在細胞膜脂質雙層的內側,而在細胞凋亡早期,細胞膜中的PS由脂膜內側翻向外側。在體內,巨噬細胞可以識別翻轉到細胞膜表面的PS 從而將這些程序性死亡的細胞清除,因此凋亡過程中并不伴隨局部的炎癥反應,而在細胞壞死的過程中則常常伴隨著炎癥反應。

AnnexinⅤ是一種分子量為35-36kD的Ca2+依賴性磷脂結合蛋白,能與細胞凋亡過程中翻轉到膜外的PS高親和力特異性結合。PS 外翻發生在細胞核破裂,DNA 片段化以及凋亡相關蛋白出現之前,這使得Annexin V 與PS 的結合成為凋亡早期的一種重要檢測標志事件。


檢測原理:

用標記了FITC的AnnexinⅤ作為熒光探針,利用流式細胞儀或熒光顯微鏡可檢測細胞凋亡的發生。細胞壞死的過程中也會發生細胞膜損傷,壞死的細胞會結合Annexin V-FITC。正常細胞和早期凋亡細胞的細胞膜是完整的,Propidium iodide(PI)是一種核酸染料,它不能透過完整的細胞膜,但在凋亡中晚期的細胞和壞死細胞,PI能夠透過細胞膜與細胞核結合呈現紅色。將AnnexinⅤ與PI匹配使用,可以將凋亡早期的細胞和晚期的細胞以及死細胞區分開來。壞死細胞可以同時與Annexin V-FITC 和PI 結合顯色,而PI 則被排除在活細胞(FITC 陰性)和早期凋亡細胞(FITC 陽性)之外。在沒有巨噬細胞的情況下,凋亡的最后階段會像細胞壞死一樣發生整個細胞的解體,從而使凋亡晚期的細胞也同時被FITC 和PI 結合染色呈現雙陽性。


貝博Annexin V-FITC / PI 細胞凋亡檢測試劑盒可以方便快捷的檢測凋亡細胞,使用流式細胞儀、熒光顯微鏡或其它熒光檢測設備進行檢測。


  產品特點:

● 方便:可用流式細胞儀或熒光顯微鏡檢測;

● 快速:1小時內即可完成實驗;

● 準確:能準確區分活細胞、凋亡細胞和壞死細胞,并計數各群細胞的比例。


  檢測方法:

流式細胞儀或熒光顯微鏡


  Annexin V-FITC / PI 細胞凋亡檢測試劑盒樣本類型:

● 懸浮細胞

● 貼壁細胞

樣品染色:

1、 離心收集懸浮細胞。離心機300-500g,2-8°C,離心時間5min,棄培養基。

2、 用冷PBS洗滌細胞兩次。(300g,2-8°C,離心時間5min收集細胞)。

3、 用400ul 1X Annexin V結合液懸浮細胞,濃度大約為1 X 106 cells/ml。

4、 在細胞懸浮液中加入5ul Annexin V-FITC染色液,輕輕混勻后于2-8°C避光條件下孵育15分鐘。

5、 加入5-10ul PI染色液后輕輕混勻于2-8°C避光條件下孵育5分鐘。

6、 立即用流式細胞儀或熒光顯微鏡檢測。


流式細胞儀分析:

經處理過的細胞此時可以在流式細胞儀上分析。激發波長為488nm。

按照常規的流式凋亡檢測的操作即可。

Annexin V-FITC的綠色熒光發射波長530nm,信號可以通過FL1(FITC接收器)通道檢測;PI紅色熒光在620nm,通過FL2(Propidium iodide接收器)通道或FL3通道檢測。


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