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目錄:上海貝博生物科技有限公司>>蛋白質生物學>>蛋白提取和裂解>> 組織蛋白快速提取試劑盒（離心柱法）

組織蛋白快速提取試劑盒（離心柱法）
  • 組織蛋白快速提取試劑盒（離心柱法）
參考價 面議
具體成交價以合同協議為準
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  • 品牌 貝博生物
  • 型號
  • 廠商性質 生產商
  • 所在地
屬性

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更新時間：2024-11-10 07:41:23瀏覽次數：53評價

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產品概述 product description 貝博® BBproExtra® 組織蛋白提取試劑盒提供全套試劑，適用于從各種動物組織樣本中提取總蛋白。提取過程簡單方便。試劑盒所配離心柱用來有效去除非蛋白質類雜質，并非采用離心柱吸附蛋白質。 本試劑盒含有的配方能夠有效溶解細胞膜組份，包括細胞質膜、核膜和各種細胞器膜。本試劑盒含有的蛋白酶抑制劑混合物，阻止了蛋白酶對蛋白的降解，為提取高純度的蛋白提供了保證。 本試劑盒提取的蛋白可用于Western Blotting、蛋白質電泳、免疫沉淀、ELISA、轉錄活性分析、Gel shift凝膠阻滯實驗、酶活性測定等下游蛋白研究實驗。 本試劑盒提取的蛋白為具有天然蛋白構象的活性蛋白。 本試劑盒中不含有EDTA，與金屬螯和層析等下游應用兼容。
保存溫度
2-8℃
注意事項
1.蛋白酶抑制劑未開蓋使用前也可以2-8℃儲存。開蓋使用后-20℃儲存。
2.蛋白酶抑制劑在2-8℃低溫時是固體狀態，從冰箱取出后恢復至室溫或37℃短時間水浴，變成液體狀態后離心至管底部再開蓋。
3.試劑拆封后請盡快使用完！
有效期
一年
檢測方法
離心柱
適用樣本
動物組織
產品特點
1、 使用方便。
2、 含蛋白穩定劑，提取的蛋白穩定。
3、 紫外檢測蛋白濃度時，背景干擾低。
4、 蛋白酶抑制劑抑制了蛋白的降解，蛋白酶抑制劑配方優化。蛋白酶抑制劑混合物包含6種獨立的蛋白酶抑制劑；每一種抑制劑可特異性抑制某一種或幾種蛋白酶活性。該混合物優化的組成使其可以抑制幾乎所有重要的蛋白酶活性，包括蛋白酶、半酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶、丙氨酰-氨基肽酶等。
產品應用
離心柱
儀器準備
1.離心機
2.振蕩器
3.渦旋混勻器
4.移液器
5.冰箱
6.冰盒
試劑準備
1.PBS緩沖液
2.蛋白定量試劑盒
耗材準備
1.離心管
2.吸頭
3.一次性手套
使用注意事項
使用注意事項：
? 旋帽離心管裝的試劑在開蓋前請短暫離心，將蓋內壁上的液體甩至管底，避免開蓋時液體灑落。
? 蛋白酶抑制劑在2-8℃時是固體狀態，從冰箱取出后恢復至室溫或37℃短時間水浴，變成液體狀態后離心至管底部再開蓋。
? 實驗過程中的所有試劑須預冷；所有器具須放-20℃冰箱預冷。整個過程須保持樣品處于低溫。
? 蛋白酶抑制劑儲存期間溶液如果出現沉淀，不影響使用，溶解后正常使用。
? 如果試劑盒不能短時間內用完，蛋白酶抑制劑混合物不可以一次全部加入提取液。
? 可以根據自己實驗需要加入其它蛋白酶抑制劑單品。
?
使用方法
1. 提取液制備：
每500ul蛋白提取液中加入2ul蛋白酶抑制劑混合物和2ul蛋白穩定劑，混勻后置冰上備用。
2. 取50-100mg組織，用PBS洗干凈。然后用刀剪碎，加入500ul蛋白提取液，用組織勻漿器/勻漿機勻漿至無明顯肉眼可見固體。
3. 將組織勻漿吸入一預冷的干凈離心管中，在4℃條件下振蕩10-20分鐘。
4. 套上液體收集管，將提取液吸入蛋白離心管內管中，在4℃，10000g條件下離心5分鐘。
5. 收集套管內液體即得到組織總蛋白。
6. 將上述蛋白提取物定量后分裝于-80℃冰箱保存備用或直接用于下游實驗。

凍存樣本：
1. 凍存組織樣本參照上述組織樣本步驟操作。
2. 凍存樣本不用PBS洗滌，直接加入蛋白提取液處理即可。
常見問題分析
1.細胞裂解速度慢？
為了充分保證提取得到的蛋白的活性，提取液采用的保護蛋白的配方，裂解能力溫和，下游應用范圍廣。適當延長裂解的時間即可。
2.蛋白濃度低？
處理部分組織樣本時可能沒有裂解，導致蛋白濃度低。只要適當延長試劑A的處理時間即可。在持續振蕩的條件下處理，沒有振蕩器也可間隔幾分鐘用吸頭吹打混勻。
3. 用什么方法定量蛋白？
建議用BCA法。不適合用Bradford法，因為試劑A中含有干擾Bradford法的組份，導致定量不準。如果已經進行過透析處理或者用脫鹽柱改換過緩沖體系，則可以用Bradford法定量。
4.提取的蛋白具有活性嗎？
本試劑盒不含有離子型去垢劑組份，不破壞蛋白的結構，沒有對蛋白質之間原有的相互作用的破壞，蛋白均保持其天然構象和活性。

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