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小鼠elisa試劑盒摘要：近的研究已經(jīng)確定細(xì)胞內(nèi)代謝作為巨噬細(xì)胞功能的基本決定因素。肥胖，炎性巨噬細(xì)胞聚集在脂肪組織中，引發(fā)慢性低度炎癥，促進(jìn)了系統(tǒng)性胰島素抵抗的發(fā)展，但其胞內(nèi)能量代謝的變化目前尚不清楚。我們開始研究脂肪組織巨噬細(xì)胞（ATM）在瘦和肥胖條件下的代謝特征。方法：從肥胖與瘦小鼠分離F4/80陽性脂肪組織巨噬細(xì)胞。用高脂喂養(yǎng)的野生型小鼠和髓系特異性HIF1α/-小鼠，用以檢測缺氧誘導(dǎo)因子-1α（HIF-1α）在肥胖脂肪組織ATMS部分中的作用。轉(zhuǎn)錄組分析，實時通量測量，ELISA和其他幾種方法被用來確定代謝特征和巨噬細(xì)胞的炎癥狀態(tài)。此外，各種代謝途徑被抑制以確定它們與細(xì)胞因子產(chǎn)生的相關(guān)性。
結(jié)果：小鼠ATMS轉(zhuǎn)錄組分析及細(xì)胞外通量測定揭示肥胖的代謝特征是增加糖酵解和氧化磷酸化。肥胖者CD14+細(xì)胞的類似代謝激活與糖尿病結(jié)果相關(guān)。在肥胖小鼠和瘦小鼠腹腔巨噬細(xì)胞中未觀察到這些變化，并且M1啟動巨噬細(xì)胞與代謝重組不相似。一組脂肪組織衍生因子誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞的代謝激活，具有劑量依賴性，不被瘦素或乳酸減少。使用代謝抑制劑，我們確定了各種代謝途徑，包括脂肪酸氧化，糖酵解和谷氨酰胺分解，這有助于ATM在瘦肉脂肪組織中釋放細(xì)胞因子。糖酵解似乎是肥胖脂肪組織巨噬細(xì)胞炎癥反應(yīng)的主要因素。HIF-1α是糖酵解的關(guān)鍵調(diào)節(jié)因子，但在肥胖早期ATM的促炎性激活中似乎不起關(guān)鍵作用。