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抗原抗體反應的特點及影響反應因素探討
閱讀：95 發布時間：2024-9-19 抗原抗體反應是指抗原與相應抗體之間所發生的特異性結合反應。這種反應既可在機體內進行，也可以在機體外進行。在機體內，當免疫細胞被抗原激活后，由B細胞分化成熟為漿細胞后所合成、分泌的一類能與相應抗原特異性結合的具有免疫功能的球蛋白（immunoglobulin，Ig），激活補體系統從而解除抗原對機體的損傷。
抗原抗體反應的主要特點：
1、特異性：特定的抗體只能與特定的抗原（肽段/蛋白）結合，這在WB一抗二抗的種屬及反應性的選擇常用到；
2、比例性：抗原抗體在整個反應中存在一定的量比關系，只有當二者濃度比例適當時才出現可見反應；WB中蛋白上樣量和一抗二抗的稀釋比例與此有關，實際操作中抗體的量相對較多，這也是為何抗體可以反復使用的原因之一；
3、可逆性：抗原抗體的結合是非共價結合，在一定條件下這種非共價結合是可逆的；因此，同一NC膜/PVDF膜在Stripping（抗體洗脫）以后可以用來檢測其他蛋白；
4、階段性：抗原抗體特異性反應分兩階段，第一階段反應迅速，第二階段反應緩慢，兩階段均為特異性結合；WB中抗原抗體結合在室溫下，反應1小時結合率可達95%，2小時可達97%以上；4℃在，反應4-6小時可達90%，8小時可達95%（本人忘記了具體的數值，但大致如此）。
影響抗原抗體反應的兩個因素：
1、反應物自身的因素
抗體：不同來源的抗體,反應性各有差異,抗體的濃度、特異性和親和力都影響抗體抗原反應,為提高試驗的可靠性,應選擇高特異性、高親和力的抗體作診斷試劑.等價帶的寬窄也影響抗原抗體復合物的形成,單克隆抗體不適用于沉淀反應.
抗原：抗原的理化性狀、分子量、抗原決定簇的種類及數目均可影響反應結果.顆粒性抗原出現凝集反應,可溶性抗原出現沉淀反應,單價抗原與相應抗體結合不出現沉淀現象.
2、反應環境條件
酸堿度：抗原抗體反應必須在合適的pH環境中進行.蛋白質具有兩性電離性質,因此每種蛋白質都有固定的等電點.抗原抗體反應一般在pH6～9進行,有補體參與的反應pH為7.7.4,pH過高或過低都將影響抗原與抗體反應。
溫度：在一定范圍內,溫度升高可加速分子運動,抗原與抗體碰撞機會增多,使反應加速.一般為15℃～40℃,常用的抗原抗體反應溫度為37℃,溫度如高于56℃,可導致已結合的抗原抗體再解離,甚至變性或破壞.每種試驗都有其du 特的適反應溫度要求.此外,適當振蕩也可促進抗原抗體分子的接觸,加速反應。
電解質：抗原與抗體發生特異性結合后,雖由親水膠體變為疏水膠體,若溶液中無電解質參加,仍不出現可見反應.為了促成沉淀物或凝集物的形成,常用0.85%NaCl或各種緩沖液作為抗原及抗體的稀釋液。