公司產(chǎn)品僅用于科研
產(chǎn)品名稱：人胃粘膜上皮細胞組織解離液
規(guī)格：3×1ml
細胞凍存步驟： 
   待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面T25瓶為例； 1．細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶，細胞變圓脫落后，加入2ml*培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標識。明舟生物按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存。3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
復蘇細胞步驟：    將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。

細胞培養(yǎng)的優(yōu)點：
1.研究的對象是活細胞
在實驗過程中，根據(jù)要求可始終保持細胞活力，并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況，包括活細胞的形態(tài)、結構、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學的條件，可以根據(jù)實際需要進行人為的控制，同時，可以施加化學、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察，這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。
3.研究的樣本可以達到比較均一性
通過細胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞，需要時，可采用克隆化等方法使細胞達到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學、原位雜交、同位素標記等各種儀器設備 
記錄方式可采用攝影照片、縮時電影、電視等多種手段。
5.研究的范圍比較廣泛
應用的學科領域較為寬廣，如細胞學、免疫學、腫瘤學、生物化學、遺傳學、分子生物學等；
適用的對象范圍廣，從低等動物到高等動物，一種動物的不同年齡階段以及不同組織，都可進行有針對性的研究。
6.研究的費用相對較經(jīng)濟
可提供大量、同一時期、重復性好的、生物學性狀相似的實驗對象
HDGF  肝癌衍生生長因子抗體（高遷移率族蛋白1樣蛋白2抗體） 0.2ml
HOXB2  同源盒蛋白B2抗體 0.1ml
HOXB8  同源盒蛋白B8抗體 0.2ml
HSPA6  熱休克蛋白70家族蛋白6抗體 0.2ml
Id1  DNA結合抑制因子1抗體 0.2ml
LAPTM4B  溶酶體蛋白跨膜β4抗體 0.2ml
LDOC1/BCUR1  癌癥亮氨酸拉鏈下調(diào)因子1抗體 0.2ml
LOXL2  賴氨酰氧化酶相關蛋白2抗體 0.2ml
人胃粘膜上皮細胞組織解離液LRRN5  富含亮氨酸重復神經(jīng)元5抗體 0.2ml
Lipophilin B  親脂性蛋白B抗體 0.2ml
MAG1  肺癌轉移相關蛋白抗體 0.2ml
MARVELD1  候選腫瘤抑制基因MARVELD1抗體 0.2ml
MOBK1B/C2orf6  2號染色體開放閱讀框6抗體 0.2ml
MT1  成熟T淋巴細胞增殖蛋白1抗體 0.2ml
Mimitin  MYC誘導線粒體蛋白抗體 0.2ml
NANOGP8  干細胞轉錄因子NANOGP8抗體 0.2ml
NOL8  核仁蛋白8抗體 0.2ml
NUP88  核孔復合體蛋白88抗體 0.2ml
OCC1  結腸癌過度表達蛋白1抗體 0.2ml
OCIAD2  卵巢癌免疫反應抗原抗體 0.2ml
OLFM4  凋亡蛋白OLFM44抗體 0.2ml
ORAV1  口腔癌高表達的蛋白1抗體 0.2ml
ORP4/OSBP2  氧化固醇結合蛋白4抗體 0.2ml
PAGE1  前列腺相關P抗原家族成員1抗體 0.2ml
PAI1/PLANH1/Serpine 1  內(nèi)皮細胞纖溶酶原激活抑制蛋白1抗體 0.2ml
NMT1  豆蔻酰基轉移酶1抗體 0.2ml
GPR171/Platelet Activating Receptor H963  G蛋白偶聯(lián)受體171抗體 0.2ml
POT1  端粒保護蛋白1抗體 0.2ml
PRSS3  腦胰蛋白酶3抗體 0.2ml
HDBP2/PTTG1IP  乳頭瘤病毒調(diào)控因子1抗體（鋅指蛋白395） 0.2ml
PCANAP2/Prostein  前列腺癌相關蛋白2抗體 0.2ml
RLBP1L1  視黃醛結合蛋白1抗體 0.2ml
RING5  環(huán)指蛋白5抗體（E3泛素蛋白連接酶RNF5） 0.2ml
RPL15  核糖體蛋白L15抗體 0.2ml
RPL19  核糖體蛋白L19抗體 0.2ml
RPL5  核糖體蛋白L5抗體 0.2ml
RRBP1  核糖體結合蛋白1抗體 0.2ml
S100A7/Psoriasin  S100鈣結合蛋白A7抗體 0.2ml
RBBP6  視網(wǎng)膜母細胞瘤結合蛋白6抗體 0.2ml
S100PBP/S100P binding protein  S100P結合蛋白抗體 0.2ml
SAMD14  SAMD14抗體 0.2ml
CDMP1/GDF5  軟骨衍生形態(tài)發(fā)生蛋白1抗體 0.2ml
RNA polymerase II CTD repeat YSPTSPS (phospho S2)  磷酸化RNA聚合酶II CTD抗體 0.1ml
RNA polymerase II CTD repeat YSPTSPS (phospho S5)  磷酸化RNA聚合酶II CTD抗體 0.1ml
RNASE4/Angiogenin  血管生成素核糖核酸酶4抗體(肌性側索硬化癥蛋白) 0.1ml

操作流程：
1.1主要試劑與儀器：倒置相差顯微鏡（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293細胞的復蘇培養(yǎng)傳代及凍存：
1.2.1 細胞的復蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液（37℃預熱，8～10倍體積）離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi)，在37℃、5％co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細胞傳代 原代培養(yǎng)的hek－293細胞48h換液1次，細胞長至60%～70%融合時，用0.25%胰酶消化1～2min，將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁、懸浮、分散，為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次，獲得細胞懸液，然后加入倍量的培養(yǎng)基，溫和混勻，吸管分裝混合液，傳代擴增細胞。
1.3 細胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細胞的計數(shù) 常規(guī)消化細胞，待細胞變圓、脫壁并浮起，加入少量培養(yǎng)基離心，再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液。在細胞計數(shù)板蓋玻片的一側加微量細胞懸液，用10×物鏡觀察計數(shù)板四角大方格細胞數(shù)，按公式計算出細胞數(shù)。細胞數(shù)/ml原液＝(四方格細胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細胞的貼壁率 指數(shù)生長期的細胞，以0.25％胰酶消化成單細胞懸液，計數(shù)后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中，每兩小時隨機取出3瓶細胞，吸除培養(yǎng)基及未貼壁細胞，加入胰消化酶消化、計數(shù)已貼壁細胞，取其平均值，按照公式：貼壁率(%)=(已貼壁細胞數(shù)/接種細胞數(shù)) ×100％，計算貼壁率。
1.6 生長曲線 取指數(shù)生長期的細胞用胰酶消化制成單細胞懸液，以1×104/孔接種于24孔板，每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機取3孔，計數(shù)每孔細胞的數(shù)目并計算平均值。連續(xù)計數(shù)10d，繪制細胞生長曲線。