詳細(xì)介紹
PCR基本操作:
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原理是由一對(duì)引物介導(dǎo),能在動(dòng)植物體外對(duì)特定基因(DNA)片斷進(jìn)行快速酶促擴(kuò)增,經(jīng)過n個(gè)熱循環(huán)擴(kuò)增,擴(kuò)增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0<E<1,擴(kuò)增效率=倍,使得檢測(cè)擴(kuò)增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。
特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對(duì)原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性;
④靶基因的特異性與保守性。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 分類 |
衣氏放線菌PCR檢測(cè)試劑盒說明書 | Actinomyces israeliiPCR | PCR檢測(cè)試劑盒 |
實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng):
1)RT-PCR可以檢測(cè)組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號(hào);
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程,最后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括定量和相對(duì)定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR
衣氏放線菌PCR檢測(cè)試劑盒說明書PCR反應(yīng)特點(diǎn)
(1) 特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對(duì)原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性;
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對(duì)原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行,結(jié)合的特異性大大增加,被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級(jí)的起始待測(cè)模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個(gè)細(xì)胞中檢出一個(gè)靶細(xì)胞;在病毒的檢測(cè)中,PCR的靈敏度可達(dá)3個(gè)RFU(空斑形成單位);在細(xì)菌學(xué)中zui小檢出率為3個(gè)細(xì)菌。
(3) 簡(jiǎn)便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應(yīng)液加好后,即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng),一般在2~4 小時(shí)完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無放射性污染、易推廣。
(4) 對(duì)標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板。可直接用臨床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。
奧布卡因標(biāo)準(zhǔn)品 CAS: 5987-82-6 Benoxinate Hydrochloride 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 200mg
醛標(biāo)準(zhǔn)品 CAS: 100-52-7 Benzaldehyde (List Chemical) 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 1ml
扎銨標(biāo)準(zhǔn)品 CAS: 8001-54-5 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 5ml
芐索銨標(biāo)準(zhǔn)品 CAS: 121-54-0 Benzethonium Chloride 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 500mg
佐卡因標(biāo)準(zhǔn)品 CAS: 34584 Benzocaine 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 500mg
標(biāo)準(zhǔn)品 CAS: 65-85-0 Benzoic Acid 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 300mg
佐那酯標(biāo)準(zhǔn)品 CAS: 104-31-4 Benzonatate 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 1g
1,4-醌標(biāo)準(zhǔn)品 CAS: 106-51-4 1,4-Benzoquinone 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 200mg
U14-GFP(小鼠子細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 SW 1088[SW-1088; SW1088](人星型膠質(zhì)瘤細(xì)胞)
CM-R124大鼠脈絡(luò)膜血管細(xì)胞*培養(yǎng)100mL
VTCN1 Others Mouse 小鼠 B7-H4 / B7S1 / B7x 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)
FO小鼠骨髓瘤細(xì)胞 Mouse myeloma cell line FO DMEM培養(yǎng)+10%FBS
IL12A & IL12B Protein Mouse 重組小鼠 IL-12 (IL12A & IL12B Heterodimer) 蛋白
小鼠腎小管平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng) 100mL9041-22-9高端化學(xué)試分揀連接蛋白14(SNX14)檢測(cè)試盒(酶免疫吸附試驗(yàn)法)
9041-22-9高端化學(xué)試分揀連接蛋白16(SNX16)檢測(cè)試盒(酶免疫吸附試驗(yàn)法)
27814-48-8高端化學(xué)試矢車菊苷β6(CENTβ6)檢測(cè)試盒(酶免疫吸附試驗(yàn)法)
27814-48-8高端化學(xué)試白介1θ(IL1θ)檢測(cè)試盒(酶免疫吸附試驗(yàn)法)
29702-43-0高端化學(xué)試紋蛋白3(STRN3)檢測(cè)試盒(酶免疫吸附試驗(yàn)法)
29702-43-0高端化學(xué)試B-黑色瘤原2(BAGE2)檢測(cè)試盒(酶免疫吸附試驗(yàn)法)
1109-28-0高端化學(xué)試死亡因子4(MORF4)檢測(cè)試盒(酶免疫吸附試驗(yàn)法)
1109-28-0高端化學(xué)試防御β126(DEFβ126)檢測(cè)試盒(酶免疫吸附試驗(yàn)法)
10357-27-4高端化學(xué)試鈣黏蛋白26(CDH26)檢測(cè)試盒(酶免疫吸附試驗(yàn)法)
10357-27-4高端化學(xué)試Sideroflexin 5蛋白(SFXN5)檢測(cè)試盒(酶免疫吸附試驗(yàn)法)