詳細介紹
核糖核酸酶HCAS號:9050-76-4產品概述:
核糖核酸酶H
英文名稱:Ribonulease H
CAS號:9050-76-4
級別:BR
分子量:18.4kDa,單體
來源:大腸桿菌MRE-600細胞
濃度:2~5u/ul
活力定義:1個活性單位是指在37℃、20分鐘內催化產生1nmol酸性可溶產物所需的酶量
酶活性分析混合物:20mM Tris-HCL(PH7.8), 40mM KC1, 8mM MgCL2, 1mM DTT, 24uM[3H]-poly(A)poly(dT), 0.03mg/ml BSA, 4%(v/v)甘油
保存緩沖液組成:25mM HEPES-KOH(PH8.0), 50mM KC1, 0.1mM EDTA, 1mM DTT, 0.1mg/ml BSA, 50%(v/v)甘油
10×反應緩沖液:20mM Tris-HCL(PH7.8), 400mM KC1, 80mM MgCL2, 10mM DTT
質量控制:相關測試表明無內切或外切脫氧核糖核酸酶、核糖核酸酶污染
性狀(以下信息僅供參考):重組酶,是一種核糖核酸內切酶,它能夠特異性地水解雜交到DNA鏈上的RNA磷酸二酯鍵,故能分解RNA/DNA雜交體系中的RNA鏈。該酶不能消化單鏈或雙鏈DNA。抑制劑有金屬螯合物、SH-封閉試劑
用途:本品僅供科研,不得用于其它用途
保存:-20℃,如65℃加熱10分鐘會失活
公司優勢:
我司為專業的生物試劑公司,不僅代理各種知名的國際國內品牌,還注重自身的和,具備一定的專業背景和實力基礎。我司成立較早,在殘酷的競爭環境中屹立至今,這與我們誠信至上以及注重專業實力的信念是離不開的。經過多年的摸爬滾打,我司擁有屬于自己的營銷理念和方法。我司定位明確,客戶精準,眼光高遠,立足于當下前沿性的科研領域,提供當前科研所需的試劑以及耗材產品,客戶遍布各大高校、科研院所以及其他性的企業。關于核糖核酸酶HCAS號:9050-76-4訂購事宜以及合作詳情可點擊這里咨詢我們。
Western Blot操作方法:
1.培養細胞蛋白質樣品的制備:
1)在合適的鹽濃度下,應保持蛋白質的最大溶解性和可重復性。
2)選擇合適的表面活性劑和還原劑,破壞所有非共價結合的蛋白質復合物和共價鍵二硫鍵,使其形成一個各自多肽的溶液。
3)盡量去除核酸,多糖,脂類等干擾分子。
4)防止蛋白質在樣品處理過程中的人為的修飾,制備過程應在低溫下進行,以避免細胞破碎釋放出的各種酶類的修飾(建議加入合適的蛋白酶抑制劑)
5)樣品建議分裝成合適的量,然后冷凍干燥或直接以液體狀態置-80℃中保存,但要注意不要反復凍融。
2.組織樣品的制備:
手術切除的組織塊迅速置于預冷的0.95生理鹽水中,漂洗數次,以清潔表面的血跡,將組織稱量后切成幾個較小的組織塊放入機戒組織勻漿器中,按組織凈重,裂解液=1:10的比例,加入相應體積的裂解液進行勻漿,離心收集上清(如有粘稠物可超聲處理,具體方法見細胞培養的樣品制備,也可以冷凍干燥降解核酸后,將凍干的蛋白質樣品溶解在適當的上樣 buffer中,混勻后靜置3小時使樣品中的蛋白質充分的溶解,有5分鐘即可,4度離心收集。)加入Laemmli樣品緩沖液(視蛋白樣品濃度,以1:1或1:2的比例混合)強力混勻,樣品置100度的水浴箱水浴加熱3-5分鐘,10000g離心10分鐘,取上清液,將其轉入另一潔凈的試管中,至此,電泳樣品已準備就緒(樣品即可立即使用也可也可以分裝凍存,-20℃存放的樣品可穩定保持數月。)
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