詳細介紹
鎳NTA瓊脂糖凝膠6FF產品概述:
鎳NTA瓊脂糖凝膠6FF
英文名稱:Ni Sepharose 6 Fast Flow
其他名稱:金屬鎳螯合瓊脂糖凝膠6FF;His融合標簽蛋白純化樹脂
級別:BR
基質:6%交聯瓊脂糖凝膠
配基:Ni2+
配基密度:20~40umol/ml
吸附載量:15mg蛋白/ml
顆粒大小:45~165um
最大流速:300cm/h
PH范圍:3~10,在位清洗時pH范圍可到2~11
性狀(以下信息僅供參考):含20%乙醇,底部為膠體。其原理是利用蛋白質表面的一些氨基酸,如組氨酸能與多種過渡金屬離子如Cu2+,Zn2+,Ni2+,Co2+,Fe3+發生特殊的相互作用,能夠吸附富含這類氨基酸的蛋白質,從而達到分離純化的目的。因此,偶聯這些金屬離子的瓊脂糖凝膠就能夠選擇性地分離出這些含有多個組氨酸的蛋白以及對金屬離子有吸附作用的多肽、蛋白和核苷酸。半胱氨酸和色氨酸也能與固定金屬離子結合,但這種結合力要遠小于組氨酸殘基與金屬離子的結合力。具有特異性好、流速快的優點,顆粒粒度均勻,粒徑小,并且螯合鎳更穩定,能耐受更高的還原劑,物理和化學穩定性好
用途:本品僅供科研,不得用于其它用途。(以下用途僅供參考)分離帶His標簽的重組蛋白及能被金屬離子吸附的多肽、蛋白、核苷酸、磷酸化蛋白
保存:2~8℃
公司優勢:
我司為專業的生物試劑公司,不僅代理各種知名的國際國內品牌,還注重自身的和,具備一定的專業背景和實力基礎。我司成立較早,在殘酷的競爭環境中屹立至今,這與我們誠信至上以及注重專業實力的信念是離不開的。經過多年的摸爬滾打,我司擁有屬于自己的營銷理念和方法。我司定位明確,客戶精準,眼光高遠,立足于當下前沿性的科研領域,提供當前科研所需的試劑以及耗材產品,客戶遍布各大高校、科研院所以及其他性的企業。關于鎳NTA瓊脂糖凝膠6FF訂購事宜以及合作詳情可點擊這里咨詢我們。
Western Blot操作方法:
1.培養細胞蛋白質樣品的制備:
1)在合適的鹽濃度下,應保持蛋白質的最大溶解性和可重復性。
2)選擇合適的表面活性劑和還原劑,破壞所有非共價結合的蛋白質復合物和共價鍵二硫鍵,使其形成一個各自多肽的溶液。
3)盡量去除核酸,多糖,脂類等干擾分子。
4)防止蛋白質在樣品處理過程中的人為的修飾,制備過程應在低溫下進行,以避免細胞破碎釋放出的各種酶類的修飾(建議加入合適的蛋白酶抑制劑)
5)樣品建議分裝成合適的量,然后冷凍干燥或直接以液體狀態置-80℃中保存,但要注意不要反復凍融。
2.組織樣品的制備:
手術切除的組織塊迅速置于預冷的0.95生理鹽水中,漂洗數次,以清潔表面的血跡,將組織稱量后切成幾個較小的組織塊放入機戒組織勻漿器中,按組織凈重,裂解液=1:10的比例,加入相應體積的裂解液進行勻漿,離心收集上清(如有粘稠物可超聲處理,具體方法見細胞培養的樣品制備,也可以冷凍干燥降解核酸后,將凍干的蛋白質樣品溶解在適當的上樣 buffer中,混勻后靜置3小時使樣品中的蛋白質充分的溶解,有5分鐘即可,4度離心收集。)加入Laemmli樣品緩沖液(視蛋白樣品濃度,以1:1或1:2的比例混合)強力混勻,樣品置100度的水浴箱水浴加熱3-5分鐘,10000g離心10分鐘,取上清液,將其轉入另一潔凈的試管中,至此,電泳樣品已準備就緒(樣品即可立即使用也可也可以分裝凍存,-20℃存放的樣品可穩定保持數月。)
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