詳細介紹
需自配儀器:
1、酶標儀(比色測定波長為450nm)
2、恒溫水浴箱或氣浴箱 (孵育溫度為37℃)
3、微量移液器
基本信息:
產品名稱:糖原磷酸化酶b(GPb)紫外分光光度法
測試方法:紫外分光光度法
規格 :50管/24樣
貨號:YS-01S7064
測定意義
糖原磷酸化酶(Glycogen phosphorylase,GP,EC 2.4.1.1))是糖原分解代謝的關鍵酶,使糖原分子從非還原端逐個斷開α-1,4-糖苷鍵移去葡萄糖基,釋放1-磷酸葡萄糖,直至臨近糖原分子α-1,6-糖苷鍵分支點前4個葡萄糖基處。GP分為有活性的糖原磷酸化酶a(GPa)和無活性的糖原磷酸化酶b(GPb)兩種形式。GPb在一定濃度的腺苷酸(5,-AMP)存在下可被激活。
測定原理:
GP催化糖原和無機磷產生葡萄糖殘基生成糖原和1-磷酸葡萄糖,磷酸葡萄糖變位酶和6-磷酸葡萄糖脫氫酶進一步依次催化NADP還原生成NADPH,在340nm下測定NADPH上升速率,即可反映GP活性。添加一定濃度的腺苷酸(5,-AMP)時測定GP(GPa和GPb)活性,未添加腺苷酸(5,-AMP)時測定GPa活性,GP活性-GPa活性得到GPb活性。
需自備的儀器和用品:
紫外分光光度計/酶標儀、臺式離心機、可調式移液器、1mL石英比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
用途范圍:僅供科研研究實驗
實驗方法學:
一、肝素的配制:
市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些。可以取0.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。
肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉動,每隔5~10分鐘轉動一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。
二、血液樣本的收集:
全血根據收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時,不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時,直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實驗室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及枸櫞酸鈉。
下列是公司正在銷售的產品:
兔骨保護(OPG)聯吸附測定試劑盒 大腸埃希氏BOXI (PSHAI)
兔端錨聚合1 (TNKS1)聯吸附測定試劑盒蠟狀芽孢桿BSESI (BME1580I)
兔軟骨寡聚基質蛋白(COMP)聯吸附測定試劑盒 母雞乳桿BSEXI (BBVI)
兔糖原合成激3α(GSK3α)聯吸附測定試劑盒三葉草根瘤BSEXI (BBVI)
兔血小板激活因子(PAF)聯吸附測定試劑盒芽孢桿屬BSHTI (AGEI)
兔白介16(IL-16)聯吸附測定試劑盒香菇BSHTI (AGEI)
兔基質金屬蛋白2(MMP-2)聯吸附測定試劑盒*紫晶蠟蘑XCEI (NSPI)
兔Runt相關轉錄因子2(RUNX2)聯吸附測定試劑盒白曲霉XCEI (NSPI)
兔輔肌動蛋白α2 (ACTN2)聯吸附測定試劑盒小麥莖點霉XMII (ACCI)
兔周期依賴性激9(CDK-9)聯吸附測定試劑盒 地衣芽胞桿XMII (ACCI)
兔神經纖維網蛋白1(NRP1)聯吸附測定試劑盒膠孢ALOI
兔相關血漿蛋白2(PAPPA2)聯吸附測定試劑盒四季腐霉BFUI (BCIVI)
兔L苯解(PAL)聯吸附測定試劑盒 膠質芽孢桿(沒有可以提供的)NMUCI (TSP45I)
兔中期因子(MK)聯吸附測定試劑盒香菇PDII (NAEI)
兔接觸蛋白2(CNTN2)聯吸附測定試劑盒米根霉PDII (NAEI)
糖原磷酸化酶b(GPb)紫外分光光度法赤霉抗體Human UBC ELISA Kit胰島受體底物-2抗體流式組化
鳥嘌呤核苷結合蛋白X抗體Human TTLL10 ELISA Kit髓鞘相關糖蛋白a/b抗體流式組化
GRAM結構域蛋白2抗體Human TWF1 ELISA Kit軸索過度生長抑制因子-B抗體流式組化
γ-谷酰轉移輕鏈2抗體Human TUSC5 ELISA Kit核受體相關因子-1抗體流式組化
原鈣粘蛋白γA1抗體Human TTRAP ELISA Kit陰離子轉運蛋白-1(抗大、小鼠:XR0606R 抗人)IHC WB
G蛋白偶聯受體70抗體Human TWIST1(Twist-related protein 1) ELISA Kit因子信號傳導抑制蛋白1抗體流式組化
G蛋白偶聯受體71抗體Human TUB ELISA Kit轉甲狀腺蛋白抗體流式組化
谷受體δ2/GluR-δ2抗體Human TWIST2 ELISA KitDL-半胱鹽鹽無物
選擇抗凝的注意點:
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時可能會出現絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后用于測定。