詳細(xì)介紹
服務(wù)流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測(cè)——樣品cDNA合成——定量試驗(yàn)——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
48T 0.1PCR管 | YS-01P6391 |
自備物品:
15毫升錐形離心管:用于制備樣品的容器
比色皿:用于比色的容器
96孔酶標(biāo)板:用于比色的容器
分光光度儀:用于比色分析
酶標(biāo)儀:用于微量樣品比色分析
儲(chǔ)存條件:
14℃或-20℃
準(zhǔn)備物品
清理液(A) 毫升
染色液(t B) 微升
稀釋液(C) 毫升
溶解液(tD) 毫升
產(chǎn)品說明書 1份
定量PCR方法:
a、競(jìng)爭(zhēng)法
選擇由突變克隆產(chǎn)生的含有一個(gè)新內(nèi)切位點(diǎn)的外源競(jìng)爭(zhēng)性模板。在同一反應(yīng)管中,待測(cè)樣品與競(jìng)爭(zhēng)模板用同一對(duì)引物同時(shí)擴(kuò)增(其中一個(gè)引物為熒光標(biāo)記)。擴(kuò)增后用內(nèi)切酶消化PCR產(chǎn)物,競(jìng)爭(zhēng)性模板的產(chǎn)物被酶解為兩個(gè)片段,而待測(cè)模板不被酶切,可通過電泳或高效液相將兩種產(chǎn)物分開,分別測(cè)定熒光強(qiáng)度,根據(jù)已知模板推測(cè)未知模板的起始拷貝數(shù)。
b、內(nèi)參照法
在不同的PCR反應(yīng)管中加入已定量的內(nèi)標(biāo)和引物,內(nèi)標(biāo)用基因工程方法合成。上游引物用熒光標(biāo)記,下游引物不標(biāo)記。在模板擴(kuò)增的同時(shí),內(nèi)標(biāo)也被擴(kuò)增。在PCR產(chǎn)物中,由于內(nèi)標(biāo)與靶模板的長度不同,二者的擴(kuò)增產(chǎn)物可用電泳或高效液相分離開來,分別測(cè)定其熒光強(qiáng)度,以內(nèi)標(biāo)為對(duì)照定量待檢測(cè)模板。
c、PCR-ELISA法
利用di高辛或等標(biāo)記引物,擴(kuò)增產(chǎn)物被固相板上特異的探針?biāo)Y(jié)合,再加入抗di高辛或酶標(biāo)抗體-辣根過氧化物酶結(jié)合物,最終酶使底物顯色。常規(guī)的PCR-ELISA法只是定性實(shí)驗(yàn),若加入內(nèi)標(biāo),作出標(biāo)準(zhǔn)曲線,也可實(shí)現(xiàn)定量檢測(cè)目的。
操作程序:
由您提供該實(shí)驗(yàn)中目的基因的相關(guān)資料(如:基因名稱、序列等信息),我們共同探討服務(wù)的可能性和技術(shù)路線;
商定服務(wù)收費(fèi)、付款方式、服務(wù)期限等,并簽定技術(shù)服務(wù)合同。
有您提供實(shí)驗(yàn)所需的足夠量的實(shí)驗(yàn)樣本(100mg組織或107個(gè)細(xì)胞),本公司不接受您提供的RNA樣本
PCR所需引物/探針(如果用探針法),可以由您自己提供,也可以委托本公司設(shè)計(jì)合成(費(fèi)用另計(jì))。如果由您自己提供,必須是PAGE純化的高質(zhì)量的干粉,本公司不接受已溶解的引物/探針。
我們進(jìn)行RNA抽提、RNA定量、反轉(zhuǎn)錄、Real-time PCR擴(kuò)增、數(shù)據(jù)分析。
提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告,包括實(shí)驗(yàn)過程、所用儀器試劑、擴(kuò)增曲線、標(biāo)準(zhǔn)曲線和相關(guān)分析數(shù)據(jù)等。
使用方法:
一、樣品采集:
1、食品樣品:樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照菌檢驗(yàn)要求進(jìn)行。
2、血液樣品:用抽取受檢者靜脈血2mL,注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管,立即混勻。
3、糞便樣品:取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品:取發(fā)病部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
二、稀釋 PCR 陽性對(duì)照(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對(duì)照,只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對(duì)照。
2. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液(最好用帶芯槍頭,下同)。
4. 在 7 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對(duì)照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對(duì)照。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 6 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對(duì)照。放冰上待用
6. 換槍頭,在 5 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對(duì)照到 5 號(hào)管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對(duì)照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的陽性對(duì)照。放冰上待用。
異戊 AR,98.5%環(huán)己烷羧 ≥98%, Kosher小鼠超敏C反應(yīng)蛋白(hs-CRP)免疫試劑盒
異戊 >99%(GC)2-乙酰呋喃 99%小鼠腸脂肪結(jié)合蛋白(iFABP)免疫試劑盒
異戊 ACS,98.5%糠 AR小鼠長停滯特異性基因產(chǎn)物6(gas-6)免疫試劑盒
異戊 CP,98%糠 CP小鼠叉頭框蛋白03(FoxP3)免疫試劑盒
異戊 分子生物學(xué)級(jí),>99%(GC)糠 98%小鼠層連蛋白/板層(LN)免疫試劑盒
異戊 GCS,≥99.8% (GC)呋喃 >99.0%(GC)小鼠草膦乙酰轉(zhuǎn)移(PAT)免疫試劑盒
癸甲酯 ≥99%呋喃 CP小鼠不對(duì)稱二甲基精氨(ADMA)免疫試劑盒
椰子 98%呋喃 99.5%小鼠補(bǔ)體因子H(CFH)免疫試劑盒
壬 CP,95%呋喃 standard for GC,≥99.5% (GC) 小鼠補(bǔ)體片斷5a(C5a)免疫試劑盒
壬 97%1-甲基吡咯 99%小鼠補(bǔ)體片斷3a(C3a)免疫試劑盒
壬 分析標(biāo)準(zhǔn)品,>99.5% (GC)2-甲基四 99%小鼠補(bǔ)體蛋白5(C5)免疫試劑盒
壬色標(biāo)Standard for GC ,>99% (GC)2-甲基四 Standard for GC, ≥99.5% (GC)小鼠補(bǔ)體蛋白4(C4)免疫試劑盒
壬 98%酮 40%溶液小鼠補(bǔ)體蛋白3(C3)免疫試劑盒
1-辛 99%1,3-二 98%小鼠補(bǔ)體1抑制物抗體(C1INH)免疫試劑盒
1-辛 97%吡咯 standard for GC,>99.7%(GC)小鼠波形蛋白(VIM)免疫試劑盒
羊源性成分核酸檢測(cè)試劑盒48T 0.1PCR管雞17-酮類固醇(17-KS)ELISA試劑盒,3-溴-5-甲氧基甲二磷腺核糖基化因子鳥核交換因子2抗體
兔p53(p53)ELISA試劑盒,3-溴-5-甲氧基甲α增強(qiáng)子結(jié)合蛋白1抗體
兔子瘦(LEP)ELISA試劑盒,1,3,5-三(4 - 羥基基)脊髓小腦共濟(jì)失調(diào)10抗體
兔子白血病抑制因子受體(LIFR)ELISA試劑盒,4-溴-1,3,5-基吡唑蛋白激A錨定蛋白7抗體
胃癌標(biāo)志物ELISA試劑盒--動(dòng)物,人4-溴-1,3,5-基吡唑腺三磷結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)體12抗體
MIO培養(yǎng)基4-溴-1-甲基-1H-吡唑腺三磷結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)體9抗體
新生霉使用前,每支加入100mlHB4153中4-溴-1-甲基-1H-吡唑三磷腺結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白4抗體
CBZ-D-纈氨2,3-二羥基喹喔啉肌動(dòng)蛋白結(jié)合蛋白LIM3抗體