化工儀器網(wǎng)
詳細(xì)介紹
恒河猴腎細(xì)胞；MMK2價(jià)格懸浮細(xì)胞: 一般傳代可直接將細(xì)胞原液分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi)，加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)，如要高濃度可先離心1000rpm，5min后加入*培養(yǎng)基，輕輕吹勻后，分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi)加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。需要指出的是，在不同的科研小組中這些術(shù)語的定義會有所不同。許多研究員不用細(xì)胞系這個詞表示細(xì)胞群除非細(xì)胞經(jīng)過了遺傳改造。
細(xì)胞名稱 恒河猴腎細(xì)胞；MMK2價(jià)格
形態(tài)特性 上皮樣，多角形
品牌 貼壁生長
特征特性 該細(xì)胞來源于一雌性獼猴的腎組織。2000年由中國科學(xué)院昆明細(xì)胞庫建立。
培養(yǎng)條件 M-199：
with Earle's Balanced Salts Solution (EBSS) 15%NBS
傳代方法 1：
2傳代；3-4天一次
傳代情況 P3
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 熒光法（-）
STR -
同工酶
染色體
使用權(quán)限 B類
貼壁細(xì)胞: 對于貼壁細(xì)胞應(yīng)先吸(倒)盡培養(yǎng)基，吸的越干凈越好，以免中和后加入的消化液，使強(qiáng)度減弱（或PBS洗1－3次）。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml，按此比例進(jìn)行消化，(根據(jù)經(jīng)驗(yàn))，晃動使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘，鏡下見細(xì)胞收縮變圓或少數(shù)脫落后，輕輕振動瓶底使細(xì)胞全部脫落，加入2-3ml*培養(yǎng)基后，輕輕吹打，使細(xì)胞基本成單個懸浮，然后分置其它無菌培養(yǎng)瓶內(nèi)，加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或?qū)嶒?yàn)。
操作流程：
1.1 主要試劑與儀器：倒置相差顯微鏡（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存：
1.2.1 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細(xì)胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細(xì)胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液（37℃預(yù)熱，8～10倍體積）離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細(xì)胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi)，在37℃、5％co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細(xì)胞傳代 原代培養(yǎng)的hek－293細(xì)胞48h換液1次，細(xì)胞長至60%～70%融合時，用0.25%胰酶消化1～2min，將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細(xì)胞脫壁、懸浮、分散，為使細(xì)胞進(jìn)一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次，獲得細(xì)胞懸液，然后加入倍量的培養(yǎng)基，溫和混勻，吸管分裝混合液，傳代擴(kuò)增細(xì)胞。
1.3 細(xì)胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細(xì)胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細(xì)胞的計(jì)數(shù) 常規(guī)消化細(xì)胞，待細(xì)胞變圓、脫壁并浮起，加入少量培養(yǎng)基離心，再用pbs重懸并吹打制成細(xì)胞懸液。在細(xì)胞計(jì)數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細(xì)胞懸液，用10×物鏡觀察計(jì)數(shù)板四角大方格細(xì)胞數(shù)，按公式計(jì)算出細(xì)胞數(shù)。細(xì)胞數(shù)/ml原液＝(四方格細(xì)胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細(xì)胞的貼壁率 指數(shù)生長期的細(xì)胞，以0.25％胰酶消化成單細(xì)胞懸液，計(jì)數(shù)后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中，每兩小時隨機(jī)取出3瓶細(xì)胞，吸除培養(yǎng)基及未貼壁細(xì)胞，加入胰消化酶消化、計(jì)數(shù)已貼壁細(xì)胞，取其平均值，按照公式：貼壁率(%)=(已貼壁細(xì)胞數(shù)/接種細(xì)胞數(shù)) ×100％，計(jì)算貼壁率。
1.6 生長曲線 取指數(shù)生長期的細(xì)胞用胰酶消化制成單細(xì)胞懸液，以1×104/孔接種于24孔板，每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機(jī)取3孔，計(jì)數(shù)每孔細(xì)胞的數(shù)目并計(jì)算平均值。連續(xù)計(jì)數(shù)10d，繪制細(xì)胞生長曲線
Anti-EBNA-3/FITC 熒光素標(biāo)記EB病毒核抗原-3抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Anti-MKK3/FITC 熒光素標(biāo)記抗原活化蛋白激酶MKK3/6抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh C3orf70 3號染色體開放閱讀框70抗體 規(guī)格 0.2ml
CD33/Siglec-3(mouse ret) CD33抗原(大、小鼠) 0.5mg
HEATR7A 英文名稱： HEAT重復(fù)內(nèi)含蛋白7A蛋白抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh SCCA/SERPINB4 絲氨酸蛋白酶抑制劑B4抗體(鱗狀細(xì)胞癌抗原) 規(guī)格 0.2ml
Anti-MKK3/FITC 熒光素標(biāo)記抗原活化蛋白激酶MKK3/6抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
ILK-1(Human integrin-linked kinase 1) ELISA Kit 人整合素連接激酶1Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-Phospho-NDRG1 (Ser330) 磷酸化分化相關(guān)基因NDRG1抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh IL-4 (human) 白介素4抗體(人) 規(guī)格 0.1ml
aPT1/aPT2(Human anti-prothrombins antibodies) ELISA Kit 人抗凝血素抗體 96T
PRDM2 英文名稱： 鋅指蛋白RIZ1抗體 0.1ml
caspase-3 p12 subunit 英文名稱： 活化半胱胺酸蛋白酶蛋白3抗體 0.1ml
Anti-Phospho-NDRG1 (Ser330) 磷酸化分化相關(guān)基因NDRG1抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rabbit Anti-human IgM/FITC FITC標(biāo)記的兔抗人IgM 0.3ml
GMEB2 英文名稱： 糖皮質(zhì)激素調(diào)節(jié)元件結(jié)合蛋白2抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh alpha 2 Macroglobulin α2巨球蛋白(α-2M)抗體 規(guī)格 0.2ml
Anti-KLF9/FITC 熒光素標(biāo)記轉(zhuǎn)錄因子KLF9抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Anti-Guinea pig IgM/AP 堿性磷酸酶(AP)標(biāo)記的兔抗豚鼠IgM 規(guī)格 0.1ml
Anti-Slc26a5/Prestin/FITC 熒光素標(biāo)記外毛細(xì)胞運(yùn)動蛋白/可溶性載質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白Slc26a5抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
ICA ELISA Kit 大鼠胰島細(xì)胞抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-TSLC1 肺癌阻抑基因1抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh GFP 綠色熒光蛋白(免疫組化用抗體) 規(guī)格 0.1ml
EMA IgA ELISA Kit 大鼠抗肌內(nèi)膜抗體IgA 96T
NHLRC3 英文名稱： 非霍奇金淋巴瘤重復(fù)蛋白3抗體 0.2ml
phospho-CDC16(Ser560) 英文名稱： 磷酸化細(xì)胞分裂周期蛋白16抗體 0.1ml
Anti-TSLC1 肺癌阻抑基因1抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
化工儀器網(wǎng)