詳細介紹
細胞名稱 兔間變表皮鱗癌瘤株;VX2培養
形態特性 實體瘤
品牌 體內生長
特征特性 可在兔皮下、肌肉、肝臟、肺等部位移植,100%成瘤。皮下或肌肉移植100%肺轉移。
培養條件 -
傳代方法 制備成細胞懸液接種至大耳白等兔。
傳代情況 不詳
凍存條件 基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養法(-)
STR -
同工酶
染色體 -
使用權限 A類
兔間變表皮鱗癌瘤株;VX2培養貼壁細胞: 對于貼壁細胞應先吸(倒)盡培養基,吸的越干凈越好,以免中和后加入的消化液,使強度減弱(或PBS洗1-3次)。50ml培養瓶加入消化液約1-3ml,按此比例進行消化,(根據經驗),晃動使消化液鋪均勻置37度培養箱約2-5分鐘,鏡下見細胞收縮變圓或少數脫落后,輕輕振動瓶底使細胞全部脫落,加入2-3ml*培養基后,輕輕吹打,使細胞基本成單個懸浮,然后分置其它無菌培養瓶內,加入*培養基后繼續培養或實驗。
操作流程:
1.1 主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293細胞的復蘇培養傳代及凍存:
1.2.1 細胞的復蘇培養 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養液(37℃預熱,8~10倍體積)離心管內,稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養瓶內,在37℃、5%co2及飽和濕度下培養。
1.2.2 細胞傳代 原代培養的hek-293細胞48h換液1次,細胞長至60%~70%融合時,用0.25%胰酶消化1~2min,將培養瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁、懸浮、分散,為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細胞懸液,然后加入倍量的培養基,溫和混勻,吸管分裝混合液,傳代擴增細胞。
1.3 細胞形態的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態特征。
1.4 細胞的計數 常規消化細胞,待細胞變圓、脫壁并浮起,加入少量培養基離心,再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液。在細胞計數板蓋玻片的一側加微量細胞懸液,用10×物鏡觀察計數板四角大方格細胞數,按公式計算出細胞數。細胞數/ml原液=(四方格細胞數之和/4) ×104。
1.5 細胞的貼壁率 指數生長期的細胞,以0.25%胰酶消化成單細胞懸液,計數后分別接種于12個25cm2培養瓶中,每兩小時隨機取出3瓶細胞,吸除培養基及未貼壁細胞,加入胰消化酶消化、計數已貼壁細胞,取其平均值,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細胞數/接種細胞數) ×100%,計算貼壁率。
1.6 生長曲線 取指數生長期的細胞用胰酶消化制成單細胞懸液,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養基。每天隨機取3孔,計數每孔細胞的數目并計算平均值。連續計數10d,繪制細胞生長曲線
Anti-CT-1/CTF1/FITC 熒光素標記心肌營養素1抗體IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml
Anti-lamin B/FITC 熒光素標記核纖層蛋白B抗體IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh CCDC112/MBC1 膀胱癌突變蛋白1抗體 規格 0.2ml
GDNF (Glial cell line-derived neurotrphic factor) 膠質細胞源性神經營養因子抗原 0.5mg
HAI-1 英文名稱: 肝細胞生長因子激活物抑制劑抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh SLC6A19 鉀依賴鈉鈣交換蛋白6 規格 0.1ml
Anti-lamin B/FITC 熒光素標記核纖層蛋白B抗體IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml
Lep IgG(Mouse Leptospira IgG) ELISA Kit 小鼠鉤端螺旋體IgGMulti-class antibodies規格: 48T
anti-cath-B/CB/FITC 熒光素標記組織蛋白酶B抗體IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh eIF3H 真核翻譯起始因子3H抗體 規格 0.1ml
p53 (Rabbit p53/tumor protein) ELISA Kit 兔p53 96T
Mouse IgA 英文名稱: 兔抗小鼠IgA抗體 0.2ml
Phospho-beta-Arrestin 1 (Ser412) 英文名稱: 磷酸化β抑制蛋白1抗體 0.1ml
anti-cath-B/CB/FITC 熒光素標記組織蛋白酶B抗體IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml
Rabbit Anti-Monkey IgM/HRP 辣根過氧化物酶標記的兔抗猴IgM 0.1ml
phospho-GAB2 (Ser159) 英文名稱: 磷酸化接頭蛋白Gab2抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh ANKRD26 錨蛋白重復結構域蛋白26抗體 規格 0.2ml
Anti-Integrin AlphaE2/CD103 /FITC 熒光素標記整合素αE2抗體IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Anti-human IgG F(ab')2/Cy5 Cy5標記的兔抗人IgG F(ab')2 規格 0.1ml
Anti-Phospho-S6 Ribosomal Protein (Ser235/236)/FITC 熒光素標記磷酸化S6核糖體蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml
ECG2 (sophagus cancer-related gene-2) 食道癌相關基因(抗原)Multi-class antibodies規格: 0.5mg
Anti-CCRK 細胞周期相關激酶抗體Multi-class antibodies規格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh PAX3 配對盒基因3抗體 規格 0.1ml
DPP7 Kit Human 人 DPP7 / DPPII / DPP2 ELISA配對抗體 ELISA
Thrombin Activation peptide fragment 2 英文名稱: 凝血酶(凝血因子II)激活肽2抗體 0.1ml
CPLA2 英文名稱: 胞漿型磷脂酶A2抗體 0.2ml
Anti-CCRK 細胞周期相關激酶抗體Multi-class antibodies規格: 0.2ml
懸浮細胞: 一般傳代可直接將細胞原液分置其它培養瓶內,加入*培養基繼續培養,如要高濃度可先離心1000rpm,5min后加入*培養基,輕輕吹勻后,分置其它培養瓶內加入*培養基繼續培養。需要指出的是,在不同的科研小組中這些術語的定義會有所不同。許多研究員不用細胞系這個詞表示細胞群除非細胞經過了遺傳改造。