詳細介紹
人膀胱癌細胞;BIU-87價格懸浮細胞: 一般傳代可直接將細胞原液分置其它培養瓶內,加入*培養基繼續培養,如要高濃度可先離心1000rpm,5min后加入*培養基,輕輕吹勻后,分置其它培養瓶內加入*培養基繼續培養。需要指出的是,在不同的科研小組中這些術語的定義會有所不同。許多研究員不用細胞系這個詞表示細胞群除非細胞經過了遺傳改造。
細胞名稱 人膀胱癌細胞;BIU-87價格
形態特性 上皮細胞樣
品牌 貼壁生長
特征特性 BIU-87建系于1989年(俞莉章等)。該細胞系來源于人膀胱乳狀移行上皮癌,通常采用5×108細胞0.2ml接種裸鼠皮下,呈進行性腫瘤生長,腫瘤結節病檢與原標本癌組織相似。22代細胞群體倍增時間為34小時。細胞能在軟瓊脂上生長,克隆形成率23%。BIU-87細胞系對ConA,WGA,PSL均有凝集反應。
培養條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
傳代方法 1:
3傳代,2-3天傳一代
傳代情況 C115
凍存條件 基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR
同工酶 同工酶鑒定
染色體
使用權限 A類
貼壁細胞: 對于貼壁細胞應先吸(倒)盡培養基,吸的越干凈越好,以免中和后加入的消化液,使強度減弱(或PBS洗1-3次)。50ml培養瓶加入消化液約1-3ml,按此比例進行消化,(根據經驗),晃動使消化液鋪均勻置37度培養箱約2-5分鐘,鏡下見細胞收縮變圓或少數脫落后,輕輕振動瓶底使細胞全部脫落,加入2-3ml*培養基后,輕輕吹打,使細胞基本成單個懸浮,然后分置其它無菌培養瓶內,加入*培養基后繼續培養或實驗。
操作流程:
1.1 主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293細胞的復蘇培養傳代及凍存:
1.2.1 細胞的復蘇培養 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養液(37℃預熱,8~10倍體積)離心管內,稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養瓶內,在37℃、5%co2及飽和濕度下培養。
1.2.2 細胞傳代 原代培養的hek-293細胞48h換液1次,細胞長至60%~70%融合時,用0.25%胰酶消化1~2min,將培養瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁、懸浮、分散,為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細胞懸液,然后加入倍量的培養基,溫和混勻,吸管分裝混合液,傳代擴增細胞。
1.3 細胞形態的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態特征。
1.4 細胞的計數 常規消化細胞,待細胞變圓、脫壁并浮起,加入少量培養基離心,再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液。在細胞計數板蓋玻片的一側加微量細胞懸液,用10×物鏡觀察計數板四角大方格細胞數,按公式計算出細胞數。細胞數/ml原液=(四方格細胞數之和/4) ×104。
1.5 細胞的貼壁率 指數生長期的細胞,以0.25%胰酶消化成單細胞懸液,計數后分別接種于12個25cm2培養瓶中,每兩小時隨機取出3瓶細胞,吸除培養基及未貼壁細胞,加入胰消化酶消化、計數已貼壁細胞,取其平均值,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細胞數/接種細胞數) ×100%,計算貼壁率。
1.6 生長曲線 取指數生長期的細胞用胰酶消化制成單細胞懸液,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養基。每天隨機取3孔,計數每孔細胞的數目并計算平均值。連續計數10d,繪制細胞生長曲線
Anti-PILR Beta/FDFACT/FITC 熒光素標記Ⅱ型成對免疫球蛋白樣受體β蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml
5-HTR3(5-hydroxytryptamine (serotonin) receptor 3a) 5-羥色胺受體3抗原Multi-class antibodies規格: 0.5mg
神經生長因子-β抗體 Anti-NGF-β 0.1ml
Shiga-Like Toxin Type II Variant 英文名稱: 豬水腫素(O139)菌體蛋白抗體 0.2ml
ET-1 英文名稱: 內皮素-1抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh Phospho-p70 S6 Kinase Beta 2 (Tyr389) 磷酸化核糖體S6蛋白激酶β2抗體 規格 0.1ml
5-HTR3(5-hydroxytryptamine (serotonin) receptor 3a) 5-羥色胺受體3抗原Multi-class antibodies規格: 0.5mg
SPARC (secreted protein acidic and rich in cysteine) 富含半胱氨酸的酸性分泌蛋白抗原Multi-class antibodies規格: 0.5mg
Anti-phospho-A Raf(Ser214) 磷酸化A-Raf抗體Multi-class antibodies規格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh Periostin 成骨細胞特異性因子2抗體 規格 0.2ml
Chkl 濃縮液 0.1ml 進口分裝
TORC2 英文名稱: CREB轉錄共激活因子TORC2抗體 0.1ml
phospho-c-Abl (Tyr89) 英文名稱: 磷酸化非受體酪酸激酶c-Abl抗體 0.1ml
Anti-phospho-A Raf(Ser214) 磷酸化A-Raf抗體Multi-class antibodies規格: 0.1ml
TTF-2(thyroid transcription factor 2;forkhead box E1) 甲狀腺轉錄因子-2(抗原) 0.5ml
JunB 英文名稱: 活化蛋白激酶B抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh COMMD7 銅代謝結構域蛋白7抗體 規格 0.2ml
Anti-Protein C/FITC 熒光素標記APC活化蛋白C抗體IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Tubulin-alpha 微管蛋白α抗體 Tubulin α 規格 0.1ml
Anti-Phospho-PLC gamma 2 (Tyr1217) /FITC 熒光素標記磷酸化磷酯酶Cγ2抗體IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml
TGF Beta2 (Rabbit transforming growth factor Beta2) ELISA Kit 兔轉化生長因子β2Multi-class antibodies規格: 96T
Anti-Cyr61/FITC 熒光素標記富半胱氨酸肝素結合蛋白61IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Cytochrome P450 2D1 細胞色素CYP2D1抗體 規格 0.1ml
Anthrax Paper antigen 健康皮張炭疽抗原 1ml
LASS6 英文名稱: 長壽相關基因lASS6抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh ZNF268 鋅指脂蛋白抗體 規格 0.1ml
Anti-Cyr61/FITC 熒光素標記富半胱氨酸肝素結合蛋白61IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml