詳細介紹
準備物品
清理液(A) 毫升
染色液(t B) 微升
稀釋液(C) 毫升
溶解液(tD) 毫升
產品說明書 1份
產品名稱 | 轉基因品系番茄1345-4 PCR試劑盒 |
英文名稱 | PCR kit for transgenic tomato 1345-4 |
貨號 | YSP96767 |
?自備物品:
15毫升錐形離心管:用于制備樣品的容器
比色皿:用于比色的容器
96孔酶標板:用于比色的容器
分光光度儀:用于比色分析
酶標儀:用于微量樣品比色分析
儲存條件:
14℃或-20℃
產品僅用于科研注意事項:1.基礎程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應時間;4.循環次數;5.PCR 反應液的配制;6.PCR技術的基本原理;7.PCR的反應動力學;8.PCR擴增產物;9.PCR反應體系與反應條件。
PCR反應的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實性;
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結合是關鍵。引物與模板的結合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應中模板與引物的結合(復性)可以在較高的溫度下進行,結合的特異性大大增加,被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區,其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產物的生成量是以指數方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞;在病毒的檢測中,PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位);在細菌學中小檢出率為3個細菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應液加好后,即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應,一般在2~4 小時完成擴增反應。擴增產物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無放射性污染、易推廣。
(4) 對標本的純度要求低
不需要分離病毒或細菌及培養細胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板。可直接用臨床標本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發、細胞、活PCR技術概論。
反應五要素:
參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現非特異條帶。ATG隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內部出現二級結構,避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數第二個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數據庫的其它序列無明顯同源性。
產品僅用于科研引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量產生所需要的結果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。
豬瘟英文名稱:Collagen II英文簡稱Col II 檢測范圍:7272nmol/L-40ng/mL
豬瘟病毒英文名稱:Proteasome Subunit Beta Type 5英文簡稱PSMb5 檢測范圍:1638nmol/L-20ng/mL
豬瘟病毒包膜糖蛋白E2英文名稱:melanocyte IgM antibody英文簡稱MC IgM Ab 檢測范圍:1909nmol/L-30ng/mL
豬藍耳病英文名稱:transforming growth factor 英文簡稱TGF 檢測范圍:7506nmol/L-800pg/mL
豬藍耳病M蛋白英文名稱:Interleukin 17A英文簡稱IL-17A 檢測范圍:7392nmol/L-32pg/mL
豬藍耳病GP5蛋白英文名稱:Hepatitis A virus type antibody 3英文簡稱HAV-Ab 3 檢測范圍:7346nmol/L-
豬繁殖與呼吸綜合征/豬藍耳病英文名稱:carbonic anhydrase III英文簡稱CA-III 檢測范圍:7578nmol/L-48U/L
珠蛋白轉錄因子1英文名稱:DOPAC英文簡稱DOPAC 檢測范圍:4460nmol/L-
Eplerenone 規格:HPLC>98%,標準品 AHA3(擬南芥)
Etodolac 規格:>98.5%,BR A-Raf
Etodolac 規格:HPLC>98%,標準品 紅細胞腺苷脫氨酶3
Etonogestrel 規格:>98% 星形膠質細胞
Everolimus;RAD001 規格:>95%,mTOR抑制劑,BR 醛縮酶A
FluocinoloneAcetonide 規格:>98%,BR 雄激素結合蛋白
FluocinoloneAcetonide 規格:HPLC>98%,標準品 肝再生增強因子
Flupirtinemaleate 規格:>98% APP/ABPP淀粉樣肽前體蛋白
Flupirtinemaleate 規格:HPLC>98%,標準品 甲胎蛋白單克隆(包被)
轉基因品系番茄1345-4 PCR試劑盒口蹄疫病毒A型抗體(N端) 英文縮寫:ETEA
腎刷狀緣抗體 英文縮寫:ETFA
FLAG Tag標簽抗體(N端) 英文縮寫:ETFB
FAM166A蛋白抗體 英文縮寫:ETFDH
脂肪酸合成酶抗體 英文縮寫:ETHE1
腦型脂肪酸結合蛋白抗體(C端) 英文縮寫:ETL
磷酸化纖維束蛋白同源物1抗體 英文縮寫:ETNK2
粘著斑激酶抗體 英文縮寫:ETS1
凝血因子5抗體 英文縮寫:ETS1 associated protein II
成纖維細胞生長因子10抗體 英文縮寫:ets1/E26 (E-twenty six 1)