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艾杜糖-2-硫酸酯酶(IDS)重組蛋白

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更新時間:2023-03-30 14:35:55瀏覽次數:490

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產品簡介

供貨周期 現貨 規格 詳見說明書
應用領域 化工 主要用途 科研
英文名稱 Recombinant Iduronate-2-Sulfatase (IDS) 物種 Mus musculus (Mouse,小鼠)
來源 原核表達 應用 Cell culture; Activity Assa
艾杜糖-2-硫酸酯酶(IDS)重組蛋白的相關產品:蛋白激酶Cε(PKCe)重組蛋白 物種; Rattus norvegicus (Rat,大鼠) 來源; 原核表達 性狀:凍干粉 神經元特異性烯醇化酶(NSE)重組蛋白 物種; Oryctolagus cuniculus (Rabbit,兔) 來源; 原核表達 性狀:凍干粉 脂蛋白脂酶(LPL)重組蛋白 物種; Homo sapiens (Human

詳細介紹

標簽選擇:

親和標簽:蛋白重組表達過程中采用親和標簽融合表達有兩方面的作用:一方面是為了使蛋白純化過程變得更加容易;另一方面是為了促進某些不溶性蛋白可溶。蛋白標簽可分兩類:一類是短肽類標簽;一類是長肽以融合蛋白(fused partner)形式共表達。使用不同的蛋白標簽需要根據具體案例來分析。

不同的系統步驟稍微有些不同的,大致步驟如下:

真核表達系統的重組蛋白表達步驟:

a.      選擇表達載體和宿主細胞(常用的CHOHEK293

b.      表達載體的構建

c.      無內毒素的質粒抽提

d.      細胞瞬時轉染

e.      表達小試,條件優化

f.       表達分析和鑒定(SDS-PGAEWB

g.      大量表達

h.      親和純化

i.        檢測和鑒定

僅供科研實驗產品屬性:

產品名稱

物種

性狀

來源

艾杜糖-2-硫酸酯酶(IDS)重組蛋白

Mus musculus (Mouse,小鼠)

凍干粉

原核表達

英文名稱:Recombinant Iduronate-2-Sulfatase (IDS)

MPS2; SIDS; Hunter Syndrome; Idursulfase; Alpha-L-iduronate sulfate sulfatase

酶與激酶

物種:Mus musculus (Mouse,小鼠)

來源:原核表達

宿主E.coli

內毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測定)

亞細胞定位::溶酶體

預測分子量:31.8kDa

實際分子量:34kDa(差異分析請參閱說明書)

片段與標簽:Leu180~Asp448 with N-terminal His Tag

緩沖液成份:20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液(pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% TrehaloseProclin300

性狀:凍干粉

純度:> 90%

等電點:5.8

應用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規格10μg 50μg 200μg 1mg 5mg

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1.png

原核表達系統的重組蛋白表達步驟:

a.      選擇表達載體

b.      密碼子優化

c.      基因合成/亞克隆

d.      轉化表達菌株

e.      蛋白表達小試分析

f.       如果蛋白可溶,蛋白親和純化

g.      如果蛋白不可溶,則需要變復性來制備可溶蛋白。

h.      鑒定,包括SDS-PAGEWB鑒定

GZMH蛋白;表達蛋白的分析、純化、檢測

  誘導表達成功后,表達蛋白的分析、純化、檢測應該順當,按一般的實驗步驟做沒太大的問題。

操作步驟 :

根據使用量,取每 1mL RIPA 加入 10uL PMSF,使 PMSF zui終濃度為 1mM?;靹騻溆茫?span>PMSF 現用現加)。

1、樣品前處理:

a)對于貼壁細胞:去除培養液,用 PBS、生理鹽水或無血清培養液洗一遍。按照 6 孔板每孔細胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液。用槍吹打數下,使裂解液和細胞充分接觸。

b)對于懸浮細胞:離心收集細胞,用手指把細胞用力彈散。按照6孔板每孔細胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液,再用手指輕彈以充分裂解細胞。充分裂解后應沒有明顯的細胞沉淀。如果細胞量較多,必需分裝成 50-100 萬細胞/管,然后再裂解。

c)對于組織樣品: 切成細小的碎片。按照每 20mg 組織加入 150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以適當添加更多的裂解液,如果需要高濃度的蛋白樣品,可以適當減少裂解液的用量)。用玻璃勻漿器勻漿,直至充分裂解。

2、后處理:

將裂解后的樣品 10000-14000g 離心 3-5 分鐘,取上清,即可進行后續的蛋白濃度測定、SDS-PAGE、Western blotting 和免疫沉淀等操作。

病毒性出血性敗血癥病毒PCR檢測試劑盒 規格 50T 英文; Viral Hemorrhagic Septicemia Virus(VHSV)RTPCR

丙酸蛛網菌PCR檢測試劑盒 規格 50T 英文; Arachnia propionicaPCR

變形絲囊霉菌PCR檢測試劑盒 規格 50T 英文; Aphanomyces astaciPCR

鼻血吸蟲PCR檢測試劑盒 規格 50T 英文; Schistosoma nasalePCR

大鼠細胞間粘附分子1(ICAM1)ELISA試劑盒 ,英文名: ICAM1 ELISA Kit

Mouse growth factor (GH) ELISA Kit 小鼠生長因子(GH)ELISA試劑盒

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極小棒桿菌PCR檢測試劑盒 英文名稱; Corynebacterium minutissimumPCR

即腸道病毒型PCR檢測試劑盒 英文名稱; Enteric Virus72(EV72HAV)72RTPCR

注意事項:  

1、不同細胞或組織樣品所需的固定時間有所不同,應當根據細胞或組織的種類以及組織塊的大小來調整固定時間。

2、雖然作用溫和,但能硬化組織,固定時間過久會導致組織變脆,切片時易碎。因此固定時間通常不宜超過 24 小時。

3、醛基與抗原蛋白的氨基交聯形成羧甲基,使抗原決定簇的三維構象出現空間障礙。分子間交聯形成的網格結構可能部分或 掩蓋某些抗原決定簇,使之不能充分暴露,可造成假陰性的染色,影響免疫組化結果。因此,4%固定的細胞或組織樣品在進行免疫組化檢測時,有時需要對抗原先進行修復,然后才能進行免疫染色等后續操作。

4、本產品對人體有害,操作時請小心,并注意有效防護以避免直接接觸人體或吸入體內。

5、為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作


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