詳細介紹
ELISA方法被廣泛應用于各種抗原和抗體測定。 但ELISA測定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術要求,在檢測過程中除正常反應外,有時常見到一些錯誤的結果。
引起ELISA測定錯誤結果的原因主要有:
①標本因素;
②試劑因素;
③操作因素。在實驗過程中請嚴格按照使用說明操作,必能得出準確的實驗結果,可提供免費技術咨詢服務!
產品名稱:鈣鎂ATP酶免費代測試劑盒規格
英文名稱:Ca~(2+)-Mg~(2+)-ATPase
檢測范圍:62.5pg/ml~2000pg/ml
貨號:YS-E989446
?保存條件:2-8℃低溫保存
保質期:6個月,所有試劑盒均提供批次。
試劑盒成分:酶標板,試劑,標準品等。
選型:
產品規格:96T/48T
96T指可以做94個標本-2個標準對照-84個樣本
48T指可以做47個標本-1個標準對照-42個樣本
主要成分:酶標板,試劑,標準品等。
試劑盒種屬:馬鈴薯、鹿、羊、雞、鴨、魚、人、大鼠、小鼠、豚鼠、倉鼠、裸鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛等動植物。
檢測目的:用于測定血清,血漿及相關液體等樣本。例如適合檢測包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細胞培養上清、組織勻漿等標本..
試劑盒組成:
1 | 20 倍濃縮洗滌液 | 30ml×1 瓶 | 7 | 終止液 | 6ml×1 瓶 |
2 | 酶標試劑 | 6ml×1 瓶 | 8 | 標準品(270ng/L) | 0.5ml×1 瓶 |
3 | 酶標包被板 | 12 孔×8 條 | 9 | 標準品稀釋液 | 1.5ml×1 瓶 |
4 | 樣品稀釋液 | 6ml×1 瓶 | 10 | 說明書 | 1 份 |
5 | 顯色劑 A 液 | 6ml×1 瓶 | 11 | 封板膜 | 2 張 |
6 | 顯色劑 B 液 | 6ml×1/瓶 | 12 | 密封袋 | 1 個 |
樣本要求:
1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融。
2.不能檢測含 NaN3 的樣品,因 NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
2400 ng/L | 5 號標準品 | 150µl 的原倍標準品加入 150µl 標準品稀釋液 |
1200ng/L | 4 號標準品 | 150µl 的 5 號標準品加入 150µl 標準品稀釋液 |
600ng/L | 3 號標準品 | 150µl 的 4 號標準品加入 150µl 標準品稀釋液 |
300ng/L | 2 號標準品 | 150µl 的 3 號標準品加入 150µl 標準品稀釋液 |
150ng/L | 1 號標準品 | 150µl 的 2 號標準品加入 150µl 標準品稀釋液 |
實驗注意事項:
1、手工洗板方法:吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標板內的液體;在實驗臺上鋪墊幾層吸水紙,酶標板朝下用力拍幾次;將推薦的洗滌緩沖液至少0.4ml注入孔內,浸泡1-2分鐘,根據需要,重復此過程數次。
2、自動洗板:如果有自動洗板機,應在熟練使用后再用到正式實驗過程中。
3、只有全部使用KA&M-BIO配套試劑才能保證檢測效果,因為所有試劑都是有關聯的,不能混用其他商的產品。只有嚴格遵守KA&M-BIO試劑盒的說明操作才會得到的檢測結果。
4、在儲存及孵育過程中避免將試劑暴露在強光中。所有試劑瓶蓋須蓋緊以防止蒸發和污染,試劑避免受到微生物的污染,因為蛋白水解酶的干擾將導致出現錯誤的結果。
5、濃洗滌液會有鹽析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶。
6、剛開啟的酶標板孔中可能會有少許水樣物質,此為正常現象,不會對實驗結果造成任何影響。
7、所有的樣品都應管理好,按照規定的程序處理樣品和檢測裝置。
8、有效期:6個月。
SV40T轉化臍靜脈內皮細胞;PUMC-HUVEC-T1果膠(半乳糖醛酸(干基計)≥74.0 %)質量規格:半乳糖醛酸(干基計)≥74.0 %Pectin
HA Others H5N1 甲型流感 H5N1 (A/Hong Kong/483/97) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 細胞裂解液 (陽性對照) 1酸三丁酯(AR,99%)質量規格:AR,99%Tributyl phosphate
CL-0184PANC-1(胰腺癌細胞)5×106cells/瓶×21酸三丁酯(CP)質量規格:CPTributyl phosphate
TNK2 Others Human ACK1 / TNK2 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 1酸三丁酯(標準品)質量規格:分析標準品Tributyl phosphate
上皮細胞裂解物HMEpiCL3,5-二水楊酸鋰(>98%,BC)質量規格:>98%,BCLithium 3,5-diiodosalicylate
TNFRSF21 Others Human DR6 / TNFRSF21 細胞裂解液 (陽性對照) N-芐氧羰基-D-色酸,英文名或英文縮寫:CBZ-D-Trp,級別:特,98%,規格:10克
神經元RNAHN miRNA5 μg均本四加臘酐 1,2,4,5-Bqnzqnqtqtrcccrboxylic cnhydridq 1989/3/7
FCER1A Others Human FcERI / FCER1A 細胞裂解液 (陽性對照) 米力農相關物質A Milrinonq Rqlctqd CoMpound c;1,6-Dixy7no-2-Mqthyl-6-oxo(3,4'-bipyridinq)-5-ccrboxcMidq 80047-4-1
冠狀動脈內皮細胞*培養基 100mL四乙酸二基二鈉鹽,英文名或英文縮寫:EDTA-2Na,級別:BR,99%,規格:1克
3T3NIH細胞,小鼠成纖維細胞 HUVEC(臍靜脈血管內皮細胞) 小鼠垂體瘤細胞;GT1-1GDX 502(聚二本多孔小球)NA
成纖維細胞生長添加物(不含動物成分)FGS-acf環辛酮,英文名或英文縮寫:Cyclooctane,級別:BR,97%,規格:25克
白牦牛皮膚細胞;Yak-2 橫紋肌瘤細胞,A673細胞 NAMALWA(Butt's 瘤細胞)4,7-二本基-1,10-啰啉 Bcthophqncnthrolinq 166-01-7
EB病毒轉化的B細胞;Mao鄰本二酸二辛酯,英文名或英文縮寫:DIOP,級別:CP,94%,規格:100克
IL11RA Others Human IL11RA / IL11Rα 細胞裂解液 (陽性對照) CarboxypeptidaseY(Yeast)羧肽酶Y(酵母)100克細胞培養級,85%
T-108B膠原酶(含100mL酶解緩沖液)10mL.6-二基1,6-HEXANEDIAMINE
鈣鎂ATP酶免費代測試劑盒規格VNN2 Others Human VNN2 / Vanin-2 細胞裂解液 (陽性對照) 酮舍林1酸鹽(標準品)Ketanserin Tartrate質量規格:HPLC>98%,標準品
小腸隱窩上皮細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)酮康唑Ketoconazole質量規格:>99%,BR
ERP27 Others Human ERP27 細胞裂解液 (陽性對照) 酮康唑(標準品)Ketoconazole質量規格:HPLC>99%,標準品
大鼠膀胱上皮細胞*培養基 100mL霉素,柱晶白霉素Kitasamycin質量規格:效價≥1300U/MG,BR
HL-60原髓細胞白血病細胞 HL-60 primary human myeloid leukemia cells IMDM(GIBCO)+20%FBS拉坦前列腺素Latanoprost質量規格:含量>99.0%
使用方法:
測定法的靈敏度來自作為報告的酶。,酶是一種有機催化劑,很少量的酶即可誘導大量的催化反應,產生可供觀察的顯色反應現象。因此該體系常被稱為酶放大體系。
1. 標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。 24μg/ml 5號標準品 150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液
12μg/ml 4號標準品 150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋液
6μg/ml 3號標準品 150μl的4號標準品加入150μl標準品稀釋液
3μg/ml 2號標準品 150μl的3號標準品加入150μl標準品稀釋液
1.5μg/ml 1號標準品 150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液
2. 加樣:分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。|
3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4. 配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。
7. 溫育:操作同3。
8. 洗滌:操作同5。
9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。
11. 測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止液后15分鐘以內進行。