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內(nèi)質(zhì)網(wǎng)氨肽酶2(ERAP2)重組蛋白

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更新時間:2023-03-30 16:39:21瀏覽次數(shù):443

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 詳見說明書
應(yīng)用領(lǐng)域 化工 主要用途 科研
英文名稱 Recombinant Endoplasmic Reticulum Aminopeptid 物種 Homo sapiens (Human,人)
來源 原核表達 應(yīng)用 Cell culture; Activity Assa
內(nèi)質(zhì)網(wǎng)氨肽酶2(ERAP2)重組蛋白的相關(guān)產(chǎn)品:3-羥基異丁酸脫氫酶(HIBADH)重組蛋白 物種; Homo sapiens (Human,人) 來源; 原核表達 性狀:凍干粉 乙醇脫氫酶1(ADH1)重組蛋白 物種; Homo sapiens (Human,人) 來源; 原核表達 性狀:凍干粉 2',5'-寡腺苷酸合成酶2(OAS2)重組蛋白 物種; Sus scrofa; Porcine (

詳細介紹

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僅供科研實驗產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

物種

性狀

來源

內(nèi)質(zhì)網(wǎng)氨肽酶2(ERAP2)重組蛋白

Homo sapiens (Human,人)

凍干粉

原核表達

英文名稱:Recombinant Endoplasmic Reticulum Aminopeptidase 2 (ERAP2)

L-RAP; LRAP; Leukocyte-Derived Arginine Aminopeptidase

酶與激酶

物種:Homo sapiens (Human,人)

來源:原核表達

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測定)

亞細胞定位::細胞膜

預(yù)測分子量:30.0kDa

實際分子量:34kDa(差異分析請參閱說明書)

片段與標(biāo)簽:Pro41~Phe271 with N-terminal His Tag

緩沖液成份:20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液(pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% TrehaloseProclin300

性狀:凍干粉

純度:> 97%

等電點:5.5

應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg 50μg 200μg 1mg 5mg

1.png

標(biāo)簽選擇:

親和標(biāo)簽:蛋白重組表達過程中采用親和標(biāo)簽融合表達有兩方面的作用:一方面是為了使蛋白純化過程變得更加容易;另一方面是為了促進某些不溶性蛋白可溶。蛋白標(biāo)簽可分兩類:一類是短肽類標(biāo)簽;一類是長肽以融合蛋白(fused partner)形式共表達。使用不同的蛋白標(biāo)簽需要根據(jù)具體案例來分析。

不同的系統(tǒng)步驟稍微有些不同的,大致步驟如下:

真核表達系統(tǒng)的重組蛋白表達步驟:

a.      選擇表達載體和宿主細胞(常用的CHOHEK293

b.      表達載體的構(gòu)建

c.      無內(nèi)毒素的質(zhì)粒抽提

d.      細胞瞬時轉(zhuǎn)染

e.      表達小試,條件優(yōu)化

f.       表達分析和鑒定(SDS-PGAEWB

g.      大量表達

h.      親和純化

i.        檢測和鑒定

原核表達系統(tǒng)的重組蛋白表達步驟:

a.      選擇表達載體

b.      密碼子優(yōu)化

c.      基因合成/亞克隆

d.      轉(zhuǎn)化表達菌株

e.      蛋白表達小試分析

f.       如果蛋白可溶,蛋白親和純化

g.      如果蛋白不可溶,則需要變復(fù)性來制備可溶蛋白。

h.      鑒定,包括SDS-PAGEWB鑒定

GZMH蛋白;表達蛋白的分析、純化、檢測

  誘導(dǎo)表達成功后,表達蛋白的分析、純化、檢測應(yīng)該順當(dāng),按一般的實驗步驟做沒太大的問題。

操作步驟 :

根據(jù)使用量,取每 1mL RIPA 加入 10uL PMSF,使 PMSF zui終濃度為 1mM。混勻備用(PMSF 現(xiàn)用現(xiàn)加)。

1、樣品前處理:

a)對于貼壁細胞:去除培養(yǎng)液,用 PBS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍。按照 6 孔板每孔細胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液。用槍吹打數(shù)下,使裂解液和細胞充分接觸。

b)對于懸浮細胞:離心收集細胞,用手指把細胞用力彈散。按照6孔板每孔細胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液,再用手指輕彈以充分裂解細胞。充分裂解后應(yīng)沒有明顯的細胞沉淀。如果細胞量較多,必需分裝成 50-100 萬細胞/管,然后再裂解。

c)對于組織樣品: 切成細小的碎片。按照每 20mg 組織加入 150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以適當(dāng)添加更多的裂解液,如果需要高濃度的蛋白樣品,可以適當(dāng)減少裂解液的用量)。用玻璃勻漿器勻漿,直至充分裂解。

2、后處理:

將裂解后的樣品 10000-14000g 離心 3-5 分鐘,取上清,即可進行后續(xù)的蛋白濃度測定、SDS-PAGEWestern blotting 和免疫沉淀等操作。

星狀諾卡菌PCR檢測試劑盒 規(guī)格 50T 英文; Nocardia asteroidesPCR

小孢子酒曲菌PCR檢測試劑盒 規(guī)格 50T 英文; Rhizopus microspousPCR

武氏盾螨PCR檢測試劑盒 規(guī)格 50T 英文; Acarapis woodiPCR

微黃線蟲PCR檢測試劑盒 規(guī)格 50T 英文; Nematodirus helvetianusPCR

大鼠成纖維細胞生長因子13(FGF-13)ELISA試劑盒 ,英文名: FGF-13 ELISA Kit

Mouse CXC chemokine ligand 16 (CXCL16) ELISA Kit 小鼠CXC趨化因子配體16(CXCL16)ELISA試劑盒

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CLIAKitforLepIgG(RabbitLeptospiraIgG)ELISAKit兔鉤端IgG規(guī)格:48T/96T

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人皰疹病毒型通用PCR檢測試劑盒 英文名稱; Human Herpesvirus6(HHV6)6PCR

人偏肺病毒PCR檢測試劑盒 英文名稱; Human Metapneumo Virus(hMPV )RTPCR

人葡萄球菌PCR檢測試劑盒 英文名稱; Staphylococcus hominisPCR

注意事項:  

1、不同細胞或組織樣品所需的固定時間有所不同,應(yīng)當(dāng)根據(jù)細胞或組織的種類以及組織塊的大小來調(diào)整固定時間。

2、雖然作用溫和,但能硬化組織,固定時間過久會導(dǎo)致組織變脆,切片時易碎。因此固定時間通常不宜超過 24 小時。

3、醛基與抗原蛋白的氨基交聯(lián)形成羧甲基,使抗原決定簇的三維構(gòu)象出現(xiàn)空間障礙。分子間交聯(lián)形成的網(wǎng)格結(jié)構(gòu)可能部分或 掩蓋某些抗原決定簇,使之不能充分暴露,可造成假陰性的染色,影響免疫組化結(jié)果。因此,4%固定的細胞或組織樣品在進行免疫組化檢測時,有時需要對抗原先進行修復(fù),然后才能進行免疫染色等后續(xù)操作。

4、本產(chǎn)品對人體有害,操作時請小心,并注意有效防護以避免直接接觸人體或吸入體內(nèi)。

5、為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作


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