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載玻細胞CASPASE-1蛋白表達

 

 

儀器設備與器具：

1 恒溫培養箱：36±1℃。

2 1000ml三角燒瓶、1ml、10ml移液管。

3 接種針。

4 顯微鏡。

5 超凈工作臺。

6 玻片、酒精燈、洗耳球、試管架。

7 天平：感量0.01g。

8 滅菌釜。

9 培養皿（直徑為90mm）、試管，經121℃、30分鐘滅菌。

10試管夾、酒精燈、秒表、載玻片

基本概念：

(1)菌群：由多種細菌混合組成的相對穩定的細菌群體，具有某些共同性狀。如大腸菌群包括大腸桿菌、產氣腸細菌及他們之間的過渡類型。

(2) 菌屬：菌種的上一級分類，通常性狀相近、親緣關系密切的若干菌種組成一個菌屬，如芽孢桿菌屬、葡萄球菌屬、乳桿菌屬等。

(3)是細菌最基本的分類單位，通常指表型特征相似、親緣關系接近的一類細菌群體，與同屬內其他種有著明顯差異；當涉及到細菌保存時，菌種是指細菌的種子（用來長期保存）資源。

(4) 菌型：同一菌種的不同細菌，在某些方面存在較小差異的為同一菌型，通常一個菌種內的細菌可以分為多種不同的菌型。

(5) 菌株：由一個獨立分離的單細胞系培養而成的純遺傳型群體及其一切后代，一種微生物的每一個不同來源的純培養物均可稱為該菌種的一個菌株。

 

培養及打管說明：

1、安瓿瓶開封：用浸過75％酒精的脫脂棉擦凈安瓿管，用火焰加熱其頂端，滴少量無菌水至加熱頂端使之破裂，用銼刀或者鑷子敲下已破裂的安瓿管頂端。

2、菌株恢復培養：用無菌吸管吸取0.3--0.5ml適宜的液體培養基，滴入安瓿管內，輕輕振蕩，使凍干菌體溶解呈懸浮狀。吸取全部菌體懸浮液，移植于1-2支建議的培養基試管中，并在建議的條件下培養。

3、注意事項：菌種活化前，請將安瓿管保存在6-10℃的環境下，某些菌種經過冷凍干燥保存后，延遲期較長，需要連續兩次繼代培養才能正常生長

4、復蘇后的菌種在傳1-2代后使用。

5、暫不啟開的安瓿及復蘇后需保藏的斜面應于4℃中保藏。

PSMD6/P44S10  調解因子6抗體 規格: 0.2mlRabbit Anti-Bovine IgM/Alexa Fluor 555  Alexa Fluor 555標記的兔抗牛IgM 規格: 0.1ml

Phospho-TCTP(Ser46)  磷化翻譯控制瘤抗體 規格: 0.1ml

Rabbit Anti-mouse IgG-Fc/Cy5  Cy5標記的兔抗小鼠IgG-Fc 規格: 0.1mlRabbit anti-Goat IgM whole serum  兔抗羊IgM抗清 規格: 1ml

C19orf45  19號染色體開放閱讀框45抗體 規格: 0.2ml

TACC1  、胃抗原GA55抗體 規格: 0.2mlATG3  自噬相關3抗體 規格: 0.1ml

Astrocyte  人星形膠質細胞抗體 規格: 0.2mlSLC16A3/MCT4  單羧轉運3/4抗體 規格: 0.2ml

CCDC125  卷曲螺旋結構域125抗體 規格: 0.2mlWnt8b  WNT家族Wnt8b抗體 規格: 0.2ml

Donkey Anti-Guinea pig IgG/FITC  FITC標記的驢抗豚鼠IgG 規格: 0.3ml

DCUN1D2  DCN1樣2抗體 規格: 0.2ml

ENPP2  核焦磷2抗體 規格: 0.2ml

phospho-PAK1(Ser144)  磷化p21激活激1抗體 規格: 0.1ml

戴氏西地西菌說明書MDR1/p-GP/CD243 (N-terminus)  多藥耐藥蛋白/P-糖蛋白抗體 規格: 0.1ml

Rabbit Anti-human sIgA/APC  APC標記的兔抗人分泌型IgA 規格: 0.1ml

SorLA/LRP9  低密度脂蛋白受體相關蛋白9抗體 規格: 0.2ml

Ulex Europaeus Lectin 1/UEA1  荊豆凝集素1抗體 規格: 0.2ml

C17orf104  17號染色體開放閱讀框104抗體 規格: 0.2ml

FNDC1  Ⅲ型纖維連接蛋白域蛋白1 規格: 0.2ml

phospho-PAK3(Ser139)  磷酸化p21激活激3抗體 規格: 0.1ml

PPM1G  蛋白質磷酸1G抗體（PP2Cγ） 規格: 0.2ml

IGFBP5/IBP5  樣生因子結合蛋白5抗體 規格: 0.1ml

Dog IgM/Cy5.5  Cy5.5標記的兔抗犬IgM抗體 規格: 0.1ml

phospho-Androgen Receptor(Ser595)  磷酸化雄受體抗體 規格: 0.1ml

Annexin V  重組膜粘連蛋白5抗體 規格: 0.1ml

KGF/FGF7  纖維母細胞生因子7抗體 規格: 0.1ml

phospho-RAD9(Ser272)  磷酸化細胞周期檢查控制蛋白質抗體 規格: 0.1ml

操作步驟如下：

1 液體石蠟的準備 選用優質化學純液體石蠟，將液體石蠟分裝加塞，用牛皮紙包好，采用以下兩種方式進行滅菌：121℃濕熱滅菌30min，置40℃恒溫箱中蒸發水分，經無菌檢查后備用。160℃干熱滅菌2個小時，冷卻后，經無菌檢查后備用。

2 斜面培養物的制備   參照定期移植法。

3 灌注石蠟  將無菌的液體石蠟在無菌條件*入培養好的新鮮斜面培養物上,液面高出斜面頂部1cm左右，使菌體與空氣隔絕。

4 保藏 4.1　注入液體石蠟的菌種斜面以直立狀態置低溫（4～6℃）干燥處保藏，保藏時間2～10年。 4.2　保藏期間應定期檢查，如培養基露出液面，應及時補充無菌的液體石蠟。

5 恢復培養   恢復培養時，挑取少量菌體轉接在適宜的新鮮培養基上，生長繁殖后，再重新轉接一次。