詳細介紹
細胞培養方法:
1、細胞傳代:細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆蓋整個瓶或皿,蓋好放入培養箱消化;
③1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入*培養基終止消化;若細胞還是貼壁,放回培養箱繼續消化至可以輕輕吹打下為止;
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清;
⑤用新鮮培養基重懸后加入培養瓶或皿中,T25培養瓶加6-8ml培養基;
⑥懸浮細胞直接離心收集,細胞沉淀重懸后分到新培養瓶中。
2、細胞復蘇:
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時間1min左右,加入4-5ml培養基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養基吹勻,將細胞懸液加入培養瓶中,補加適量培養基。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%胰蛋白酶(T25瓶)
②1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入*培養基終止消化;
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細胞;
④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。
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產品名稱:L-O2(正常肝細胞)
規格:5×106cells
貨號:YS-02X9790
產品分類:細胞系
儲存條件2℃-8℃,避光儲存
運輸條件冰袋冷藏運輸
注意事項
1、使用產品時應注意無菌操作,避免污染。
2、本產品含有血清和雙抗,如無特別需要不用額外再添加血清和雙抗,可以直接使用。
3、為保持本產品的最佳使用效果,不宜將其長時間放置于室溫或較高的溫度環境中。
4、所有產品請于保質期內使用,超出保質期,必須放棄使用。
5、本產品只供進一步科研使用,不可應用于臨床等其他方面。
實驗材料:
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養液1瓶;8ml小牛血清(FCS) 1瓶;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶;PBS(-)1 瓶
2. 100ml滅菌燒杯2個; 人皮膚成纖維細胞,CCC-HSF-1細胞
3、50ml離心筒2個
4、滅菌培養皿1個,細胞培養瓶1個
5、1ml ,200μl移液器各1支;槍頭盒2個;無菌玻璃攪拌棒1個
6、細胞計數板1塊;
7、滅好菌的鑷子1把,剪刀1把;
8、酒精燈1臺;
細胞復蘇步驟:
1:水浴鍋預熱至37℃備用
2:準備15mL離心管,并向其中加入適量培養基待用
3:將細胞凍存管從-80℃冰箱或液氮中取出,放入PE手套中,迅速投入水浴鍋
4:用力搖晃凍存管,使其在1分鐘內融化
5:用紙巾擦拭水漬,轉移至生物安全柜。用移液槍吸取細胞懸液,緩慢滴加到步驟2中準備好的離心管
6:1200rpm離心3分鐘
7:棄上清,用新鮮培養基重懸細胞,接種至新的無菌培養器皿中
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64544-07-6呋辛酯 規格: 50mg
28789-35-7降二氫辣椒 規格: HPLC≥98%;20mg
219944-46-4異七葉皂Ib;Isoescin Ib 規格: 10mg
70674-90-7長春質;Catharanthine 規格: 20mg
C19H17O3?SO3Na丹參IIA-磺鈉; 丹參IIA磺 規格: HPLC≥98%,20mg/支