我司供應(yīng)的生化檢測(cè)試劑盒,僅供科研使用。
商品介紹:
測(cè)定意義
ICDHm(EC 1.1.1.41)廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞的線粒體中,在三羧酸循中催化異檸檬酸生成α-酮戊二酸,同時(shí)將NAD+ 還原為NADH,是三羧酸循環(huán)的限速酶之一,其催化的反應(yīng)是細(xì)胞NADH主要來(lái)源之一。
測(cè)定原理
ICDHm催化NAD+ 還原生成NADH,導(dǎo)致340nm處光吸收上升。
需自備的儀器和用品
紫外分光光度計(jì)、水浴鍋、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、1 mL石英比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
通用規(guī)則:
1、洗液不夠時(shí),可用蒸餾水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸緩沖液,加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長(zhǎng)期保存。
2、液體全部加完后,可將酶標(biāo)板在桌子上平行輕輕晃動(dòng)30秒,混勻液體。也可以用酶標(biāo)儀的晃動(dòng)功能。
3、底物有一定的毒性,終止液對(duì)皮膚有腐蝕性,應(yīng)盡量避免接觸。
4、檢測(cè)前,要打開(kāi)酶標(biāo)儀,使之穩(wěn)定10分鐘以上。
5、吸取液體時(shí),要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。
6、將液體加到酶標(biāo)孔中時(shí),避免槍頭和孔內(nèi)液體接觸,可使槍頭上的液滴和孔壁接觸,液滴會(huì)自然流下去。
7、溫浴時(shí),要用不干膠或膠帶紙封好酶標(biāo)板,防止水分的蒸發(fā)。
8、洗板時(shí),每次洗液加入后,應(yīng)靜置1分鐘,使清洗更加*。沒(méi)有洗板機(jī)時(shí),倒去液體后,要將酶標(biāo)板在報(bào)紙或毛紙上用力拍干。
9、用槍吸取液體時(shí)速度不能太快,以免產(chǎn)生氣泡而使吸取量不準(zhǔn)確。
10、底物是光敏感的,要在臨用前現(xiàn)配。
實(shí)驗(yàn)通用規(guī)則:
1、洗液不夠時(shí),可用蒸餾水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸緩沖液,加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長(zhǎng)期保存。
2、液體全部加完后,可將酶標(biāo)板在桌子上平行輕輕晃動(dòng)30秒,混勻液體。也可以用酶標(biāo)儀的晃動(dòng)功能。
3、底物有一定的毒性,終止液對(duì)皮膚有腐蝕性,應(yīng)盡量避免接觸。
4、檢測(cè)前,要打開(kāi)酶標(biāo)儀,使之穩(wěn)定10分鐘以上。
5、吸取液體時(shí),要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。
6、將液體加到酶標(biāo)孔中時(shí),避免槍頭和孔內(nèi)液體接觸,可使槍頭上的液滴和孔壁接觸,液滴會(huì)自然流下去。
7、溫浴時(shí),要用不干膠或膠帶紙封好酶標(biāo)板,防止水分的蒸發(fā)。
8、洗板時(shí),每次洗液加入后,應(yīng)靜置1分鐘,使清洗更加*。沒(méi)有洗板機(jī)時(shí),倒去液體后,要將酶標(biāo)板在報(bào)紙或毛紙上用力拍干。
9、用槍吸取液體時(shí)速度不能太快,以免產(chǎn)生氣泡而使吸取量不準(zhǔn)確。
10、底物是光敏感的,要在臨用前現(xiàn)配。
胰酪大豆胨液體培養(yǎng)基(TSB)(2015藥典) 英文名稱(chēng):TSB 產(chǎn)品規(guī)格:250g
硫乙酸鹽流體培養(yǎng)基(顆粒) 英文名稱(chēng): 產(chǎn)品規(guī)格:250g
磷酸鹽緩沖稀釋液(ph7.2) 英文名稱(chēng): 產(chǎn)品規(guī)格:9ml*20支
卵黃氯化鈉瓊脂培養(yǎng)基 英文名稱(chēng):Egg-Yolk Salt Agar Base 產(chǎn)品規(guī)格:250g
溴化十六烷基三甲銨瓊脂培養(yǎng)基(2015藥典) 英文名稱(chēng):Getrimide Agar 產(chǎn)品規(guī)格:250g
酵母浸出粉胨葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基(YPD) 英文名稱(chēng):Yeast Peptone Dextrose Agar 產(chǎn)品規(guī)格:250g
乳糖發(fā)酵培養(yǎng)基 英文名稱(chēng):Lactose Broth 產(chǎn)品規(guī)格:250g
曙紅亞甲基藍(lán)瓊脂培養(yǎng)基(EMB) 英文名稱(chēng):Eosin-Methylene Blue Agar 產(chǎn)品規(guī)格:250g
麥康凱瓊脂培養(yǎng)基 英文名稱(chēng):Maconkey Agar Medium 產(chǎn)品規(guī)格:250g
沙門(mén)、志賀菌屬瓊脂培養(yǎng)基(SS) 英文名稱(chēng): 產(chǎn)品規(guī)格:250g
線粒體異檸檬酸脫氫酶(ICDHm)測(cè)試盒13054-87-0(+)2-氨基丁 規(guī)格: 100mg
58-86-6木糖;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證書(shū) 規(guī)格: 0.25g
62006-39-7洋川芎內(nèi)酯A 規(guī)格: 20mg
491-50-9槲皮-7- 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支
規(guī)格: 100mg
倍他環(huán)糊精 規(guī)格: 100mg
30252-40-5藏紅花;Potassium 7-Hyd 規(guī)格: 20mg
177931-17-8三白草 規(guī)格: 20mg
比可啶 規(guī)格: 50mg
飛揚(yáng)草 規(guī)格: 1g
測(cè)定步驟:
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準(zhǔn)確
3.管底加樣,不能加在管壁上
4.加樣時(shí)不能產(chǎn)生氣泡
2.溫浴
1.加標(biāo)本后和加結(jié)合物后,應(yīng)立即放入按規(guī)定的反應(yīng)溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應(yīng)疊在一起。
3.為避免蒸發(fā),板上應(yīng)加蓋,或?qū)迤椒旁诘撞繅|有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后,反應(yīng)的時(shí)間和溫度通常不做嚴(yán)格要求。 如室溫高于20℃,ELISA板可避光放在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上,以便 不時(shí)觀察,待對(duì)照管顯色適當(dāng)時(shí),即可終止酶反應(yīng)。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過(guò)程中不是反應(yīng)步驟,但卻 是決定實(shí)驗(yàn)成敗的關(guān)鍵。
2.目的是洗去反應(yīng)液中沒(méi)有與固相抗原或 抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反應(yīng)過(guò)程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。
4.讀板
1.陰性對(duì)照顏色極淺,在定性測(cè)定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標(biāo)儀測(cè)定結(jié)果,準(zhǔn)確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標(biāo)儀的質(zhì) 量和軟件的算法。