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儀器設備與器具：

1 恒溫培養箱：36±1℃。

2 1000ml三角燒瓶、1ml、10ml移液管。

3 接種針。

4 顯微鏡。

5 超凈工作臺。

6 玻片、酒精燈、洗耳球、試管架。

7 天平：感量0.01g。

8 滅菌釜。

9 培養皿（直徑為90mm）、試管，經121℃、30分鐘滅菌。

10試管夾、酒精燈、秒表、載玻片

基本概念：

(1)菌群：由多種細菌混合組成的相對穩定的細菌群體，具有某些共同性狀。如大腸菌群包括大腸桿菌、產氣腸細菌及他們之間的過渡類型。

(2) 菌屬：菌種的上一級分類，通常性狀相近、親緣關系密切的若干菌種組成一個菌屬，如芽孢桿菌屬、葡萄球菌屬、乳桿菌屬等。

(3)是細菌最基本的分類單位，通常指表型特征相似、親緣關系接近的一類細菌群體，與同屬內其他種有著明顯差異；當涉及到細菌保存時，菌種是指細菌的種子（用來長期保存）資源。

(4) 菌型：同一菌種的不同細菌，在某些方面存在較小差異的為同一菌型，通常一個菌種內的細菌可以分為多種不同的菌型。

(5) 菌株：由一個獨立分離的單細胞系培養而成的純遺傳型群體及其一切后代，一種微生物的每一個不同來源的純培養物均可稱為該菌種的一個菌株。

 

培養及打管說明：

1、安瓿瓶開封：用浸過75％酒精的脫脂棉擦凈安瓿管，用火焰加熱其頂端，滴少量無菌水至加熱頂端使之破裂，用銼刀或者鑷子敲下已破裂的安瓿管頂端。

2、菌株恢復培養：用無菌吸管吸取0.3--0.5ml適宜的液體培養基，滴入安瓿管內，輕輕振蕩，使凍干菌體溶解呈懸浮狀。吸取全部菌體懸浮液，移植于1-2支建議的培養基試管中，并在建議的條件下培養。

3、注意事項：菌種活化前，請將安瓿管保存在6-10℃的環境下，某些菌種經過冷凍干燥保存后，延遲期較長，需要連續兩次繼代培養才能正常生長

4、復蘇后的菌種在傳1-2代后使用。

5、暫不啟開的安瓿及復蘇后需保藏的斜面應于4℃中保藏。

EC肉湯顆粒 250g 用于糞大腸群、大腸桿的測定

SS瓊脂顆粒 250g 用于沙門氏，志賀氏的選擇性分離培養

堿性蛋白胨水顆粒 250g 用于霍亂弧選擇性增培養(SN標準)

3%堿性蛋白胨水顆粒 250g 用于副溶血性弧選擇性增培養

馬鈴薯葡萄糖瓊脂（PDA）顆粒 250g 用于霉和酵母的計數和分離培養

李氏增肉湯（LB1,LB2）基礎顆粒 250g 添加萘啶酮酸，吖啶黃素即為

乳糖蛋白胨培養液顆粒 250g 用于飲用水，水源水中總大腸群的測定(GB標準)

GN 250g 用于志賀氏的增培養，亦可用于沙門氏增培養

蛋白胨緩沖液顆粒 250g 用于樣品制備的營養液

MLCB寒天培地顆粒 250g 用于沙門氏分離培養

麥康凱液體培養基 250g 用于大腸埃希選擇性增培養

胰酪大豆胨液體培養基 (TSB) 250g 一種通用的營養培養基 ，用于各種微生物的增培養

甘瓊脂培養基 250g 用于金的選擇性分離培養

紫紅膽鹽葡萄糖瓊脂培養基 250g 用于耐膽鹽革蘭氏陰性分離培養

無色桿菌屬說明書phospho-PAK6(Ser165)  磷酸化P21蛋白激活的蛋白激6 規格: 0.1mlAnei-ATX/Autotaxin  自分泌運動因子抗體 規格: 0.1ml

SYVN1  滑膜細胞凋亡抑制物1抗體 規格: 0.1mlPAFR/PTAFR  小板活化因子受體抗體 規格: 0.1ml

phospho-KCNC1(Ser503)  磷酸化離子通道蛋白Kv3.1抗體 規格: 0.1mlSIGLEC11  唾液酸結合性免疫球蛋白樣凝集素11抗體 規格: 0.2ml

FASTKD1  Fas活化激結構域蛋白1抗體 規格: 0.2mlAPPL1  銜接因子蛋白含pH域磷酸結合域和拉鏈蛋白1抗體 規格: 0.1ml

Axin1  軸蛋白1抗體 規格: 0.1ml

Mouse Anti-rabbit IgG/PE-Cy3  PE-Cy3標記的小鼠抗兔IgG 規格: 0.1ml

OMPC  大腸桿外膜孔道蛋白C抗體 規格: 0.1ml

Rex1/Zinc finger protein 754  鋅指蛋白754抗體 規格: 0.1ml

CX3CL1  CX3CL1抗體 規格: 0.2ml

Mouse Anti-rabbit IgG/Gold  膠體金標記的小鼠抗兔IgG 規格: 0.5ml

SH3TC2  脫髓鞘相關蛋白SH3TC2N抗體 規格: 0.2ml

RNF187  環指蛋白187抗體 規格: 0.2ml

ROCK2  Rho相關蛋白激2抗體 規格: 0.1ml

VGLL4  轉錄輔助因子退變樣蛋白4抗體 規格: 0.2ml

操作步驟如下：

1 液體石蠟的準備 選用優質化學純液體石蠟，將液體石蠟分裝加塞，用牛皮紙包好，采用以下兩種方式進行滅菌：121℃濕熱滅菌30min，置40℃恒溫箱中蒸發水分，經無菌檢查后備用。160℃干熱滅菌2個小時，冷卻后，經無菌檢查后備用。

2 斜面培養物的制備   參照定期移植法。

3 灌注石蠟  將無菌的液體石蠟在無菌條件*入培養好的新鮮斜面培養物上,液面高出斜面頂部1cm左右，使菌體與空氣隔絕。

4 保藏 4.1　注入液體石蠟的菌種斜面以直立狀態置低溫（4～6℃）干燥處保藏，保藏時間2～10年。 4.2　保藏期間應定期檢查，如培養基露出液面，應及時補充無菌的液體石蠟。

5 恢復培養   恢復培養時，挑取少量菌體轉接在適宜的新鮮培養基上，生長繁殖后，再重新轉接一次。