兒茶酚-O-甲基轉移酶(COMT)活性蛋白的相關產品：HA重組甲型流感 H3N8 (A/equine/Gansu/7/2008) Hemagglutinin 蛋白 (HA Subunit) (His 標簽) Protein
PAFAH2/Lp-PLA2/PLA2G7(platelet-activating factor acetylhydrolase 2 0.2mgPAFAH2/Lp-PLA2/P

僅供科研實驗產品屬性：

英文名稱：Active Catechol-O-Methyltransferase (COMT)

酶與激酶

物種：Homo sapiens (Human，人)

緩沖液成份：20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液（pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300）

性狀：凍干粉

純度：> 90%

等電點：5.6

應用：Cell culture; Activity Assays.

規格10μg 50μg 200μg 1mg 5mg

標簽選擇：

親和標簽：蛋白重組表達過程中采用親和標簽融合表達有兩方面的作用：一方面是為了使蛋白純化過程變得更加容易；另一方面是為了促進某些不溶性蛋白可溶。蛋白標簽可分兩類：一類是短肽類標簽；一類是長肽以融合蛋白（fused partner）形式共表達。使用不同的蛋白標簽需要根據具體案例來分析。

不同的系統步驟稍微有些不同的，大致步驟如下：

真核表達系統的重組蛋白表達步驟：

a.      選擇表達載體和宿主細胞（常用的CHO和HEK293）

b.      表達載體的構建

c.      無內毒素的質粒抽提

d.      細胞瞬時轉染

e.      表達小試，條件優化

f.       表達分析和鑒定（SDS-PGAE和WB）

g.      大量表達

h.      親和純化

i.        檢測和鑒定

原核表達系統的重組蛋白表達步驟：

a.      選擇表達載體

b.      密碼子優化

c.      基因合成/亞克隆

d.      轉化表達菌株

e.      蛋白表達小試分析

f.       如果蛋白可溶，蛋白親和純化

g.      如果蛋白不可溶，則需要變復性來制備可溶蛋白。

h.      鑒定，包括SDS-PAGE和WB鑒定

GZMH蛋白；表達蛋白的分析、純化、檢測

　　誘導表達成功后，表達蛋白的分析、純化、檢測應該順當，按一般的實驗步驟做沒太大的問題。

注意事項：  

1、不同細胞或組織樣品所需的固定時間有所不同，應當根據細胞或組織的種類以及組織塊的大小來調整固定時間。

2、雖然作用溫和，但能硬化組織，固定時間過久會導致組織變脆，切片時易碎。因此固定時間通常不宜超過 24 小時。

3、醛基與抗原蛋白的氨基交聯形成羧甲基，使抗原決定簇的三維構象出現空間障礙。分子間交聯形成的網格結構可能部分或 掩蓋某些抗原決定簇，使之不能充分暴露，可造成假陰性的染色，影響免疫組化結果。因此，4%固定的細胞或組織樣品在進行免疫組化檢測時，有時需要對抗原先進行修復，然后才能進行免疫染色等后續操作。

4、本產品對人體有害，操作時請小心，并注意有效防護以避免直接接觸人體或吸入體內。

5、為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作

相關產品：

PAFAH2/Lp-PLA2/PLA2G7(platelet-activating factor acetylhydrolase 2 0.2mgPAFAH2/Lp-PLA2/PLA2G7(platelet-activating factor acetylhydrolase 2) 脂蛋脂酶A2抗原

APP Protein Human 重組人 Beta-amyloid 38 / Beta-APP38 蛋白 (aa 672-709, His & GST 標簽)

HA重組甲型流感 H3N8 (A/equine/G

操作步驟 ：

根據使用量，取每 1mL RIPA 加入 10uL PMSF，使 PMSF 的zui終濃度為 1mM。混勻備用（PMSF 現用現加）。

1、樣品前處理：

a)對于貼壁細胞：去除培養液，用 PBS、生理鹽水或無血清培養液洗一遍。按照 6 孔板每孔細胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液。用槍吹打數下，使裂解液和細胞充分接觸。

b)對于懸浮細胞：離心收集細胞，用手指把細胞用力彈散。按照6孔板每孔細胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液，再用手指輕彈以充分裂解細胞。充分裂解后應沒有明顯的細胞沉淀。如果細胞量較多，必需分裝成 50-100 萬細胞/管，然后再裂解。

c)對于組織樣品： 切成細小的碎片。按照每 20mg 組織加入 150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以適當添加更多的裂解液，如果需要高濃度的蛋白樣品，可以適當減少裂解液的用量)。用玻璃勻漿器勻漿，直至充分裂解。

2、后處理：

將裂解后的樣品 10000-14000g 離心 3-5 分鐘，取上清，即可進行后續的蛋白濃度測定、SDS-PAGE、Western blotting 和免疫沉淀等操作。

牛捻轉胃蟲PCR檢測試劑盒 英文名稱; Mecistocirrus digitatusPCR 50T

牛皮蠅蛆PCR檢測試劑盒 英文名稱; Hypoderma bovisPCR 50T

牛腺病毒通用PCR檢測試劑盒 英文名稱; Bovine Adenovirus(BAV1)  PCR 50T

牛仰口線蟲PCR檢測試劑盒 英文名稱; Bunostomum phlebotomumPCR 50T

MIP-1 Beta (macrophage inflammatory protein 1 Beta) 巨噬細胞炎癥因子1β 抗原Multi-class antibodies規格： 0.5mg

Anti-beta-Amyloid 1-40(CT) β淀粉樣肽 1-40 (C端)抗體Multi-class antibodies規格： 0.1ml

Rhesus antibody Rh phospho-Bid(Ser61) 0酸化BH3結構域凋亡誘導蛋白抗體 規格 0.1ml

品名 規格 備注

VCAM1 英文名稱： 血管內皮細胞粘附分子抗體 0.1ml

DUSP22 英文名稱： 雙特異性0酸酶22抗體 0.2ml

Anti-beta-Amyloid 1-40(CT) β淀粉樣肽 1-40 (C端)抗體Multi-class antibodies規格： 0.1ml

兒茶酚-O-甲基轉移酶(COMT)活性蛋白封閉毛細線蟲PCR檢測試劑盒 英文名稱; Capillaria obsignataPCR

糞腸球菌PCR檢測試劑盒 英文名稱; Enterococcus faecalis PCR

糞產堿桿菌PCR檢測試劑盒 英文名稱; Alcaligenes faecalisPCR

奮森疏PCR檢測試劑盒 英文名稱; Borrelia vincentiPCR