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技術(shù)文章

人主要組織相容性復(fù)合體Ⅰ類 MHCⅠ/HLAⅠELISA試劑盒的間接法

閱讀:201          發(fā)布時間:2021-4-26

人主要組織相容性復(fù)合體Ⅰ類 MHCⅠ/HLAⅠELISA試劑盒的間接法:
1.用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1~10μg/ml,每孔加0.1ml,4℃過夜。
 
2.次日洗滌3次。
 
3.加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育1小時,洗滌。(同時做空白、陰性及陽性孔對照)于反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)第二抗體(抗抗體)0.1ml,37℃孵育30-60分鐘,洗滌,最后一遍用DDW洗滌。
 
4. 加底物液顯色:于各反應(yīng)孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃10~30分鐘。
 
5. 終止反應(yīng):于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml。
 
6. 結(jié)果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結(jié)果:反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深,陽性程度越強,陰性反應(yīng)為無色或極淺,依據(jù)所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號表示。也可測O·D值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對照孔調(diào)零后測各孔O·D值,若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.1倍,即為陽性。
雙抗原夾心法檢測抗體
雙抗原夾心法的反應(yīng)模式與雙抗體夾心法類似。用特異性抗原進行包被和制備酶結(jié)合物,以檢測相應(yīng)的抗體。與間接法測抗體的不同之處為以酶標(biāo)抗原代替酶標(biāo)抗抗體。此法中受檢標(biāo)本不需稀釋,可直接用于測定,因此其敏感度相對高于間接法。乙肝標(biāo)志物中抗HBs的檢測常采用本法。本法關(guān)鍵在于酶標(biāo)抗原的制備,應(yīng)根據(jù)抗原結(jié)構(gòu)的不同,尋找合適的標(biāo)記方法。

組蛋白賴氨酸N-甲基轉(zhuǎn)移酶SETD7(SETD7)ELISA試劑盒
組蛋白H3.3(H3F3A/H3.3A/H3F3/PP781H3F3B/H3.3B)ELISA試劑盒
組蛋白H2b(histon-H2b)ELISA試劑盒
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人 CD30 / TNFRSF8 ELISA配對抗體
人 REG1B ELISA配對抗體
人 PHPT1 ELISA配對抗體
人 IkB alpha / NFKBIA ELISA配對抗體
小鼠 TNFR1 / CD120a / TNFRSF1A ELISA配對抗體
小鼠 TFPI ELISA配對抗體
小鼠 Carboxypeptidase B1 / CPB1 ELISA配對抗體
人 FGFR4 / CD334 ELISA配對抗體
人 Cystatin SA / CST2 ELISA配對抗體
人 Complement Factor H / CFH ELISA配對抗體
人 BMF / Bcl2 modifying factor ELISA配對抗體
人 ADAM15 ELISA配對抗體
甲型流感 H1N1 (A/Puerto Rico/8/1934) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) ELISA配對抗體
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轉(zhuǎn)化生長因子β受體1(TGFBR1)ELISA試劑盒

 

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