γδT細胞高效擴增試劑盒*格產品簡介
γδT細胞具有在體內快速反應的特性,在受到刺激時,會先于αβ-T細胞釋放促炎性細胞因子(IFN-γ和TNF-α等)。 γδT細胞能夠激活NK細胞的腫瘤細胞毒作用,與DC細胞互刺激成熟, APC細胞抗原呈遞的功能,激活αβ-T 細胞的免疫效應, γδT細胞的殺傷作用具有非MHC限制性,廣泛的殺瘤譜,已知對至少十幾種腫瘤細胞有殺傷作用。 γδT細胞在人外周血含量很少(1-5%),本產品能夠將外周血中的單個核細胞大規模擴增成γδT細胞,具有擴增效率高,目的細胞百分比高的特點,起始單個核細胞經過14天培養,總細胞數可以擴增約50-100倍左右,γδT細胞數可以擴增500-1000倍,其純度高于85%,并且全程無血清培養,為基礎和臨床研究使用γδT細胞提供 一個有力的武器。
產品特點
1 擴增效率高:起始單個核細胞經過14天培養,總細胞可以擴增約50-100倍左右,目的細胞(γδT細胞)數可以擴增500-1000倍;
2 目的細胞百分比高: γδT細胞純度可以達到85%以上;
3 全程無血清培養。
γδT細胞高效擴增試劑盒*格試劑盒成份
使用說明
1 在血液采集前一天將100μL GD-I試劑加入4mL PBS,包被于T-75瓶,用錫紙包好,平放于4°C冰箱過夜;
注意: 確保T-175瓶平放以保證含有GD-I試劑的PBS溶液能夠均勻分布于T-75瓶底。
2 D0 用PBS溶液洗滌前一天包被的T-75瓶一次,將制備好的單個核細胞(MNC)按0.5-1M/mL細胞密度鋪于洗滌后的T-75瓶中,加入GD-IV 47.5mL, GD-II 85μL,GD-III 2.5mL以及IL-2 1000U/mL;
注意:1)洗滌時用移液管吸取20ml PBS注入T-75瓶,輕微震蕩后倒出/吸出,切忌用沖力較大的移液器或移液槍反復沖洗以免破壞包被面;
2)本試劑盒所配試劑均為整支加入,可先用移液槍移取試劑管中試劑后再用培養基沖洗試劑管確保管內剩余試劑能夠充分利用。
3)D3 補加90mL GD-IV(含IL-2 1000U/mL)和10mL GD-III,轉入細胞培養袋,此時袋子含150mL培養基;
4 )D5 往培養袋補加135mL GD-IV(含IL-2 1000U/mL)和15mL GD-III,此時袋子含300mL培養液;
5 )D7 往培養袋補加270mL GD-IV(含IL-2 1000U/mL)和30mL GD-III,此時袋子含600mL培養液;
6 )D9 每個培養袋補加460mL GD-IV(含IL-2 1000U/mL)和40mL GD-III,此時袋子含1100mL培養液;
注意: 確保T-175瓶平放以保證含有GD-I試劑的PBS溶液能夠均勻分布于T-75瓶底。
7 )D12-14 收獲γδT細胞。
培養效果
培養細胞14天后,細胞總數及目的細胞(γδ T cell)擴增倍數以及流式表型分析(N=4)
產品保存
1 本產品需避光保存;
2 GD-I,GD-IV置于2-8°C保存,有效期為12個月,其它成份包括GD-II, GD-III置于-20°C保存,有效期為24個月;
3 請于保質期內使用本產品,超過保質期,請勿使用;
4 為確保本產品的質量,請避免對其反復凍融。