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人T淋巴細胞白血病細胞Jurkat（clone E6-1）介紹

這是Jurkat-FHCRC細胞株(Jurkat細胞株的衍生)的一個克隆。 Jurkat細胞株來源于一個14歲男孩的外周血。 經佛波酯和外源凝集素或抗T3單克隆抗體(兩種類型的誘導都需要)誘導后可產生大量IL-2。

人T淋巴細胞白血病細胞Jurkat（clone E6-1）特性

1） 來源：T淋巴細胞；急性T細胞白血病

2） 形態：淋巴母細胞,懸浮生長

3） 含量：>1x106 個/mL

4） 污染：支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性

5） 規格：T25瓶或者1mL凍存管包裝

運輸和保存

可選擇干冰運輸及發送復蘇存活細胞方式

（1）干冰運輸，收到后立即轉入液氮或者-80度冰箱凍存或直接復蘇；

（2）存活細胞，收到后應繼續生長，傳代達到細胞生長狀態良好時，再進行凍存。具體操作見細胞培養步驟。

（3）收到細胞后請拍照，3天內如果發現污染，請及時拍照與我們聯系。

細胞用途：僅供科研使用。

Jurkat 人T淋巴細胞白血病細胞/STR鑒定接收后的處理：

1） 收到細胞后，請檢查發貨培養瓶的狀況，若發現培養瓶破損、有液溢出及細胞有污染，請拍照后及時聯系我們。

2） 在顯微鏡下確認細胞生長狀態時，在低倍鏡（4或5X物鏡)下進行，能準確判斷細胞的傳代密度。看細胞的形態請在10X和20×物鏡下，同時給剛收到的細胞拍照，（10×，20×）各2-3張以及培養瓶外觀照片一張留存，作為細胞需要售后時提供收到細胞時細胞狀態的依據。

3） 觀察好細胞狀態后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養箱放置約2-3h。

4） 貼壁細胞：在運輸過程中貼壁細胞會有脫落的現象，如發現貼壁細胞有脫落或者脫落后抱團生長，可將T25瓶置于37℃培養箱放置約2-3h，然后抽出瓶中的培養基和未貼壁細胞1000rpm離心5分鐘，棄去上清重懸后接種到加有按照說明書細胞培養條件新配制的*培養基的原培養瓶中（或新的培養瓶中）。

5） 懸浮細胞：T25瓶置于37℃培養箱放置約2-3h，然后抽出瓶中的培養基和細胞1000rpm離心5分鐘，棄去上清重懸后接種到新的培養瓶中（加入按照說明書細胞培養條件新配制的*培養基）。

6）備注：運輸用的培養基（灌液培養基）不能再用來培養細胞，請換用按照說明書細胞培養條件新配制的*培養基來培養細胞。  收到細胞后di一次傳代建議1：2傳代 。                    

培養步驟

一．培養基及培養凍存條件準備：

1） 準備RPMI-1640（推薦：iCell-0002）培養基；優質胎牛血清，10%； GlutaMAX （Gibco，35050061），1%；雙抗，1%。

參考傳代周期：不超過300萬細胞/ mL，建議將活細胞密度控制在10萬-100萬/ mL之間

參考傳代密度：10萬活細胞/ mL,參考換液頻率：2-3天。

2） 注意

a）該細胞為懸浮細胞，根據培養經驗以及客戶的反饋，傳代時使用【半換液法】對細胞狀態有利，因此我庫建議您使用【半換液法】進行傳代。同時，您在收到細胞后，請不要通過離心的方式收集細胞，可以直接向培養瓶中添加等體積的新鮮培養液，然后將細胞吹打均勻后移入兩個新的T25培養瓶中繼續培養即可。

b）改細胞對血清質量較為敏感，我庫建議您使用進口*優質血清進行培養。

c）該細胞對細胞密度較為敏感，培養，傳代時請注意保持細胞密度在合適的范圍。

3） 培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養箱濕度為70%-80%。

4） 凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配。

二． 細胞處理：

1） 復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜（或將細胞懸液加入250px皿中，加入約8ml培養基，培養過夜）補加到6ml。第二天換液并檢查細胞密度。

2） 細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。

對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：

1. 收到細胞后*傳代推薦將細胞懸液按1：2的比例分到新的含6ml培養基的新皿中或者瓶中，建議凍存一支備用，后續傳代根據實際情況按1:2到1:5的比例進行。換液可通過添加幾毫升新鮮培養基或離心之后去上清液，添加新培養基重懸培養。

2） 細胞凍存：待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。

下面T25瓶為類；

1，細胞凍存時，取上清，可使用血球計數板計數。

2，4min ，1000rpm 離心去掉上清。加1ml血清重懸細胞，根據細胞數量加入血清和DMSO，輕輕混勻，DMSO終濃度為10%，細胞密度1-2xE6/ml，每支凍存管凍存1ml細胞懸液，注意凍存管做好標識。

3，將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

鏡像綺點（上海）細胞技術有限公司主要產品和技術服務：

一、原代細胞服務
      各類模式哺乳動物的多種原代細胞資源；
      多種人源性正常及腫瘤原代細胞資源；
      原代細胞分離和培養相關試劑、kit、培養基添加劑等；
      原代細胞相關技術服務和整體實驗外包服務；

二、細胞株/系服務
      細胞株/系培養、增殖、凍存和相關說明書；
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      細胞系培養基、添加劑、血清及相關生長因子、試劑等；

三、iPS細胞
      iPS細胞基礎培養（有滋養層or無滋養層在）；
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四、技術外包服務：各類細胞生物學實驗、分子生物學實驗、顯微鏡拍照服務等

五、其他：根據客戶需要定制服務等