人神經母細胞瘤細胞SH-SY5Y/STR鑒定介紹
SH-SY5Y是1970年建自骨瘤轉移灶的神經母細胞瘤SK-N-SH細胞系經三次克隆后的亞系(SK-N-SH→SH-SY→SH-SY5→SH-SY5Y)。該細胞顯示中等水平的多巴胺-β-羥基酶活性。SH-SY5Y細胞的飽和密度大于1X106細胞/cm2。
人神經母細胞瘤細胞SH-SY5Y/STR鑒定特性
(1）來源：腦神經母細胞瘤，轉移部位骨髓
(2）形態：上皮細胞樣，半貼壁生長
(3）含量：>1x106個/mL
(4）污染：支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性
(5）規格：T25瓶或者1mL凍存管包裝
運輸和保存
可選擇干冰運輸及發送復蘇存活細胞方式：
（1）干冰運輸，收到后立即轉入液氮或者-80度冰箱凍存或直接復蘇；
（2）存活細胞，收到后應繼續生長，傳代達到細胞生長狀態良好時，再進行凍存。具體操作見細胞培養步驟。
（3）收到細胞后請拍照，3天內如果發現污染，請及時拍照與我們聯系。
SH-SY5Y人神經母細胞瘤細胞/STR鑒定/鏡像綺點（iCell）用途：僅供科研使用。
細胞接收后的處理：
(1）收到細胞后，請檢查是否漏液，如果漏液，請拍照片發給我們。
(2）請先在顯微鏡下確認細胞生長狀態，酒精消毒瓶壁并將T25瓶置于37℃培養約2-3h。
(3）T25瓶中的培養基取出離心后，去上清，添加6ml新的*培養基，重新加入原T25培養瓶。
(4）如果細胞長滿90%請及時進行細胞傳代，傳代培養用本公司附帶的*培養基。
(5）接到細胞次日，請檢查細胞是否污染，若發現污染或疑似污染，請及時與我們取得聯系。
細胞培養步驟
一．培養基及培養凍存條件準備：
(1）準備MEM/F-12（1：1）培養基；優質胎牛血清，10%；雙抗，1%。
(2）培養條件：氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。溫度：37攝氏度，培養箱濕度為70%-80%。
(3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配。
二．細胞處理：
(1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，離心管加入4mL培養基混合均勻。在800-1000RPM條件下離心4-5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入T25培養瓶中培養，補加培養基至6ml。
(2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。
1、將上清取出，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2、加1ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA）于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加少量*培養基終止消化。
3、輕輕打勻后吸出，和上清一起在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，加1-2mL培養液后吹勻。
4、將細胞懸液按1：2到1:5比例分到新的含6ml培養基的新皿中或者瓶中。
注：次傳代推薦傳代比例為1:2，以后傳代比例可根據客戶需要自己決定。
(3）細胞凍存：待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。
下面T25瓶為類；
1、細胞凍存時，取出上清，PBS清洗一遍后加入1ml胰酶，細胞變圓脫落后，加入1ml*培養基終止消化，可使用血球計數板計數。
2、4min1000rpm離心去掉上清。加1ml血清重懸細胞，根據細胞數量加入血清和DMSO，輕輕混勻，DMSO終濃度為10%，細胞密度1-2xE6/ml，每支凍存管凍存1ml細胞懸液，注意凍存管做好標識。
3、將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
鏡像綺點（上海）細胞技術有限公司主要產品和服務介紹：
一、原代細胞服務：
各類模式哺乳動物的多種原代細胞資源
多種人源性正常及腫瘤原代細胞資源
原代細胞分離和培養相關試劑、kit、培養基添加劑等
原代細胞相關技術服務及整體實驗外包服務
二、細胞系服務：
細胞株/系培養、增殖、凍存和相關說明書
細胞系培養過程的技術指導
細胞系培養基、添加劑、血清及相關生長因子、試劑等
三、iPS細胞服務：
iPS細胞基礎培養（有滋養層or無滋養層）
iPS細胞增殖及冷凍保存
iPS基礎培養技術實習
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