目錄:合肥恩派爾貿易有限公司>>Abnbio感受態細胞>>克隆感受態細胞 非電擊>> TurboChemically Competent Cell克隆感受態細胞
供貨周期 | 現貨 | 規格 | 50支100ul |
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貨號 | ABG023-50 | 應用領域 | 化工,生物產業,制藥 |
主要用途 | 細胞培養 |
Turbo Chemically Competent Cell
基因型:
F'proA+B+ lacIqΔlacZM15 / fhuA2 Δ(lac-proAB) glnVgalK16 galE15 R(zgb-210::Tn10) TetS endA1thi-1 Δ(hsdSmcrB)5
簡要說明:
Turbo 菌株是生長最快的大腸桿菌菌株。平板上6.5 小時可見克隆,營養液中搖菌 4-6小時可提取質粒,缺失核酸內切酶 (endA),提高了質粒DNA 的產量和質量;Turbo 菌株可嚴格控制 laclq的表達,可以克隆毒性基因;fhuA2 突變賦予Turbo 菌株對噬菌體 T1的抗性; lacZΔM15的存在使 Turbo可用于藍、白斑篩選。Turbo感受態細胞經特殊工藝制作,pUC19質粒檢測轉化效率>5×108 cfu/μg DNA。
操作說明:
1. Turbo 感受態細胞從-80℃拿出,迅速插入冰中,5分鐘后待菌塊融化,加入目的 DNA(質?;蜻B接產物) 并用手bo打 EP管底輕輕混勻(避免用槍吸打),冰中靜置25 分鐘。
2. 42℃水浴熱激 45秒,迅速放回冰上并靜置 2分鐘,晃動會降低轉化效率。
3. 向離心管中加入700 μl不含抗生素的無菌SOC 或LB培養基,混勻后 37℃,200 rpm復蘇 60分鐘。
4. 5000 rpm離心一分鐘收菌,留取 100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應抗生素的 SOC 或 LB培養基上。
5. 將平板倒置放于37℃培養 6.5 小時以上。
注意事項:
1. 感受態細胞最好在冰中緩慢融化。插入冰中8 分鐘內加入目標DNA,不可在冰中放置時間過長,長時間存放會降低轉化效率。
2. 混入目的 DNA 時應輕柔操作。
3. 轉化高濃度的質?;蚋咝实倪B接產物可相應減少最終用于涂板的菌量。