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XL1-Blue Chemically Competent Cell

基因型：

recA1 endA1 gyrA96 thi-1 hsdR17 supE44 (rk-,mk+), relA1lac [F'proAB lacIqZ?M15: Tn10 (tetR)]

簡要說明：

XL1-Blue菌株能保證高拷貝質粒穩定復制，recA1和endA1的突變有利于插入DNA的穩定和高純度質粒DNA的提取。hsdR17突變導致EcoK核酸內切酶系統缺失，增強了外源DNA的穩定性和提取質量。lacIqZΔM15 的存在使XL2-Blue菌株可用于藍、白斑篩選。此菌株具有四環素抗性。High5TM系列XL1-Blue感受態細胞經特殊工藝制作，經pUC19質粒檢測轉化效率>1×109cfu/μg。

操作說明：

1.XL1-Blue感受態細胞放置冰中融化（或放手心或室溫片刻，待菌體處于冰水混合狀態時迅速插入冰中），加入目的DNA（質粒或連接產物）并用手打EP管底輕輕混勻，冰上靜置25分鐘。

2.42℃水浴熱激45秒，迅速放回冰上并靜置2分鐘，晃動會降低轉化效率。

3.向離心管中加入700μl不含抗生素的2YT或LB無菌培養基，混勻后37℃，200rpm復蘇60分鐘。

4.5000rpm離心一分鐘收菌，留取100μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應抗生素的2YT或LB培養基上。

5.將平板倒置放于37℃培養箱過夜培養。

注意事項：

1. 感受態細胞最好在冰上融化。

2.混入質?；蜻B接產物時應輕柔操作。

3.轉化高濃度的質?；蚋咝实倪B接產物可相應減少最終用于涂板的菌量。