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人結腸癌細胞;LOVO
人結腸癌細胞;LOVO
分化的特點主要可以概括成四點:
1.持久性:細胞分化貫穿于生物體整個生命進程中,在胚胎期達到zui大程度
2.穩定性和不可逆性:一般來說,分化了的細胞將一直保持分化后的狀態,直到死亡
3.普遍性:生物界普遍存在,是生物個體發育的基礎
正常情況下,細胞分化是穩定、不可逆的。一旦細胞受到某種刺激發生變化,開始向某一方向分化后,即使引起變化的刺激不再存在,分化仍能進行,并可通過細胞分裂不斷繼續下去。
4.遺傳物質不變性:分化是伴隨著細胞分裂進行的,親代與子代細胞的形態、結構或功能發生改變,但細胞內的遺傳物質不變。
但大量科學實驗證明,在植物細胞中高度分化的植物細胞仍具有發育成完整植株的潛能,即植物細胞的全能性,但能力隨著細胞分化程度的高低所需要的條件也逐漸變化。在動物細胞中,部分細胞(有細胞核)也有此能力。胚胎細胞在顯示*的形態結構、生理功能和生化特征之前,需要經歷一個稱作決定的階段。在這一階段,細胞雖然還沒有顯示出特定的形態特征,但是內部已經發生了向這一方向分化的特定變化。細胞在整個生命進程中,在胚胎期分化達到zui大限度.細胞功能決定分化的早晚,因動物及組織的不同而有差異,但一般情況下都是漸進的過程。例如,在兩棲類,把神經胚早期的體節從正常部位移植到同一胚胎的腹部還可改變分化的方向,不形成肌肉而形成腎管及紅細胞等。但是到神經胚晚期移植體節,就不能改變體節分化的方向。可見,這時期體節的分化已穩定地決定了。
分別針對兩種運輸方式來談下對新細胞的處理過程:
對于直接寄送凍存細胞的情況,首先要檢查的就是細胞收到后是否有足量剩余干冰,如果干冰不足,或是已經沒有干冰,則細胞狀態可能會收到影響,建議盡快復蘇;如果有足量干冰,建議先轉移至-80℃冰箱過夜,于第二天按正常流程復蘇,即37℃水浴鍋中快速融解,低速離心后去除含DMSO的凍存液,換入適合細胞的新鮮培養基,輕柔吹勻后轉移至培養皿中,補足培養基;一般貼壁細胞在24h內即可觀察到細胞貼壁,從而判斷細胞狀態,懸浮細胞則復蘇后即可觀察細胞狀態。對于凍存時間較長的細胞,可能需要傳代1到2次后,細胞才會調整到正常狀態,所以細胞復蘇后如果狀態不佳,不要灰心,仍要細心培養。
對于復蘇后寄送活細胞的情況,則細胞收到后要先檢查細胞瓶是否有破損,細胞瓶在運輸中很有可能受到碰撞和擠壓,導致瓶體受損。如果發現細胞瓶受損,則需要盡快處理,該棄就棄。如果細胞瓶完好,則用酒精消毒瓶身,去除封口膜,然后置于37℃培養箱中靜置1-2h。待細胞穩定后,觀察細胞狀態,并及時記錄,因為很多國內細胞庫都是可以反饋細胞狀態的,如果收到時細胞狀態不佳甚至污染,是可以要求重新寄送的。細胞如沒有異常,則盡快傳代并更換適合細胞的新鮮培養基。由于新細胞一般都是第一次接觸,細胞傳代過程中尤為需要注意yi酶消化時間,消化時間過短或過長都會影響細胞狀態,甚至導致細胞死亡。我建議大家采用低濃度yi酶消化,消化時縮短放培養箱和觀察的間隔時間,以便盡可能找到合適的消化時間。
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