HOEC人口腔上皮細胞

HOEC人口腔上皮細胞

培養體系：DMEM高糖培養基+10%FBS+1%雙抗

　　培養溫度：37℃

　　二氧化碳濃度：5%

　　簡介：人口腔上皮細胞HOEC取自女性供體，上皮樣，貼壁培養

　　注釋：倍增時間54h

接收后的操作流程與注意事項

　　1.細胞收到后建議在培養箱穩定4小時左右再依據細胞密度，換液培養或傳代。

　　2.如果細胞為貼壁細胞，而收到時呈懸浮或者部分懸浮的狀態，請將懸浮的細胞及時離心，加15%血清的wan全培養基到新的培養皿/瓶中繼續培養3天；同時原培養瓶中剩下的貼壁細胞更換為15%血清的wan全培養基，培養2-3天。若3天后細胞都沒有出現增殖而是繼續脫落死亡，請及時聯系實驗室，技術人員會跟進解決。

　　3.貼壁細胞生長緩慢：適當提高血清濃度（最高不超過20%），或可根據該細胞生長密度，考慮胰酶消化后，轉移到新的培養瓶繼續培養。

　　4.生長不均：貼壁細胞若出現生長不均，成島狀生長，可將細胞進行消化，重新打散細胞，加入新鮮培養基進行培養。

常規培養傳代流程（請嚴格遵守無菌操作）

　　1.吸出原培養瓶中的培養基，PBS緩沖液潤洗細胞兩次，加1~2ml0.25%EDTA的胰酶消化（注意把握消化時間，通常控制在1~2min）。

　　2.鏡下觀察消化情況，在細胞邊緣縮小，貼壁運動時（不建議消化到細胞漂浮）去掉胰酶，加6~8mlwan全培養基，輕輕吹打細胞層，盡量把細胞層吹落、吹散。

　　3.取出部分細胞懸液轉移到新的培養皿/瓶中，添加適當的wan全培養基，于培養箱中培養。

　　4.注意培養基PH值變化情況，定期換液，待細胞密度達到70-80%時重復傳代操作或者凍存