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當(dāng)前位置:云克隆(北京)生物科技有限公司>>細(xì)胞庫>> YKLRDRD人惡性胚胎橫紋肌瘤細(xì)胞
產(chǎn)品型號YKLRD
品 牌其他品牌
廠商性質(zhì)經(jīng)銷商
所 在 地北京市
更新時間:2024-04-29 18:18:35瀏覽次數(shù):554次
聯(lián)系我時,請告知來自 化工儀器網(wǎng)供貨周期 | 一周 | 規(guī)格 | 1個T25瓶 |
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貨號 | YKLRD |
RD人惡性胚胎橫紋肌瘤細(xì)胞RD人惡性胚胎橫紋肌瘤細(xì)胞
保種心得:
首先,細(xì)胞采購的運(yùn)輸形式一般分為兩種,一種是直接寄送凍存細(xì)胞,一種是復(fù)蘇后寄送活細(xì)胞。前者是由液氮中取出細(xì)胞凍存管,采用干冰運(yùn)輸;后者是將細(xì)胞復(fù)蘇至T-25培養(yǎng)瓶中,采用常溫運(yùn)輸。兩者各有優(yōu)缺點,第一種方式的優(yōu)點是可以長途運(yùn)輸,因為細(xì)胞在干冰中相對穩(wěn)定,一般可以保證數(shù)周之內(nèi)不影響細(xì)胞活性,但缺點是運(yùn)輸成本高,且細(xì)胞復(fù)蘇是很復(fù)雜的過程,如果細(xì)胞復(fù)蘇后狀態(tài)不佳,則很難界定是來源的問題還是復(fù)蘇操作的問題;而第二種方式的優(yōu)點是細(xì)胞收到后可以直接通過觀察來大體了解細(xì)胞狀態(tài),并且對運(yùn)輸?shù)囊笙鄬^低,缺點則是只適合短途運(yùn)輸,因為即便運(yùn)輸時培養(yǎng)基中不添加血清,細(xì)胞還是會不斷增殖,當(dāng)細(xì)胞長滿后,細(xì)胞的狀態(tài)會隨時間的增加而不斷變差。綜上,如果是從國外大型細(xì)胞庫采購,一般采用第一種方法,既能適應(yīng)長途運(yùn)輸,且大型細(xì)胞庫的凍存細(xì)胞質(zhì)量普遍較好,在良好的操作下復(fù)蘇成活率很高;如果是從國內(nèi)細(xì)胞庫采購,則一般采用第二種方法,方便收到細(xì)胞時能較好掌握細(xì)胞狀態(tài),并且降低運(yùn)輸成本。
RD(人惡性胚胎橫紋肌瘤細(xì)胞)分別針對兩種運(yùn)輸方式來談下對新細(xì)胞的處理過程:
對于直接寄送凍存細(xì)胞的情況,首先要檢查的就是細(xì)胞收到后是否有足量剩余干冰,如果干冰不足,或是已經(jīng)沒有干冰,則細(xì)胞狀態(tài)可能會收到影響,建議盡快復(fù)蘇;如果有足量干冰,建議先轉(zhuǎn)移至-80℃冰箱過夜,于第二天按正常流程復(fù)蘇,即37℃水浴鍋中快速融解,低速離心后去除含DMSO的凍存液,換入適合細(xì)胞的新鮮培養(yǎng)基,輕柔吹勻后轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)皿中,補(bǔ)足培養(yǎng)基;一般貼壁細(xì)胞在24h內(nèi)即可觀察到細(xì)胞貼壁,從而判斷細(xì)胞狀態(tài),懸浮細(xì)胞則復(fù)蘇后即可觀察細(xì)胞狀態(tài)。對于凍存時間較長的細(xì)胞,可能需要傳代1到2次后,細(xì)胞才會調(diào)整到正常狀態(tài),所以細(xì)胞復(fù)蘇后如果狀態(tài)不佳,不要灰心,仍要細(xì)心培養(yǎng)。
對于復(fù)蘇后寄送活細(xì)胞的情況,則細(xì)胞收到后要先檢查細(xì)胞瓶是否有破損,細(xì)胞瓶在運(yùn)輸中很有可能受到碰撞和擠壓,導(dǎo)致瓶體受損。如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞瓶受損,則需要盡快處理,該棄就棄。如果細(xì)胞瓶完好,則用酒精消毒瓶身,去除封口膜,然后置于37℃培養(yǎng)箱中靜置1-2h。待細(xì)胞穩(wěn)定后,觀察細(xì)胞狀態(tài),并及時記錄,因為很多國內(nèi)細(xì)胞庫都是可以反饋細(xì)胞狀態(tài)的,如果收到時細(xì)胞狀態(tài)不佳甚至污染,是可以要求重新寄送的。細(xì)胞如沒有異常,則盡快傳代并更換適合細(xì)胞的新鮮培養(yǎng)基。由于新細(xì)胞一般都是第一次接觸,細(xì)胞傳代過程中尤為需要注意YM消化時間,消化時間過短或過長都會影響細(xì)胞狀態(tài),甚至導(dǎo)致細(xì)胞死亡。我建議大家采用低濃度YM消化,消化時縮短放培養(yǎng)箱和觀察的間隔時間,以便盡可能找到合適的消化時間。
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