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U-87 MG人腦星形膠質母細胞瘤細胞介紹:
種屬:人;貼壁生長;生長周期:3~4天
細胞形態:上皮細胞樣
細胞生長:貼壁
U-87 MG人腦星形膠質母細胞瘤細胞培養及其操作步驟:
【瘤細胞懸液接種】
1)無菌選取生長良HAO(有光澤,淡紅色)瘤組織或對數生長期培養瘤細胞;
2)在PBS中將瘤組織碎后用勻漿器研磨,經80~100目篩網過濾成細胞懸液;
3)培養細胞應用PBS洗兩遍;
4)計數并調整細胞濃度至107~108/ml;
5)常規消毒后,于接種部位(通常為背部或腋窩腹股溝皮下)用醫用注射器皮下潛行一段后注入細胞懸液(0.1ml/部位,>106細胞)。初次接種成功率低,細胞數盡可能多一些;
6)次日注意觀察動物一般情況。初次接種一般有一段較長的潛伏期,以后隨著傳代潛伏期逐漸縮短,最后固定為一個相對穩定的時間。
【腹水瘤的建立與腹水瘤的接種】將實體瘤細胞直接種于小鼠腹腔、腹壁或其他部位,引起腹水,腹水中含有瘤細胞,將這種腹水反復傳代,即可成為腹水瘤。初次傳代時,腹水常呈血性(含大量紅細胞),反復傳代后腹水逐漸變成乳白色。腹水瘤的接種過程如下:
1)將凍存或培養的腹水瘤細胞離心和洗滌,進行細胞計數;
2)消毒動物,左下腹穿刺接種106腹水瘤細胞;
3)接種腹水瘤細胞后約7~12d,待小鼠腹部明顯膨大。用碘酒棉球消毒小鼠腹部,用9號針頭抽取腹水,也可行腹部解剖后,用滴管吸取。每只小鼠可抽3~5ml;
4)抽取的腹水經3000rpm離心15min,收集上清,分裝凍存備用。
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