詳細(xì)介紹
樣品準(zhǔn)備:
1)血清-----操作過程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2)血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測(cè)。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
3)細(xì)胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4)組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液
5)保存------如果樣品不立即使用,應(yīng)將其分成小部分-70 ℃保存,避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測(cè)前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
服務(wù):
我們可以根據(jù)您的應(yīng)用需要,比如在檢測(cè)范圍、種屬以及靈敏度等方面有特殊要求,而量身定制檢測(cè)試劑盒,有效控制檢測(cè)試劑成本。并可提供免費(fèi)代測(cè)。僅供科研實(shí)驗(yàn)。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 規(guī)格 |
人分泌型卷曲相關(guān)蛋白4ELISA試劑盒 | sFRP-4 ELISA Kit | 48T/96T |
試劑盒組成及試劑配制 :
1. 酶聯(lián)板(Assay plate ):一塊(96孔)。
2. 標(biāo)準(zhǔn)品(Standard):2瓶(凍干品)。
3. 樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4. 標(biāo)記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5. 辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6. 標(biāo)記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7. 辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8. 底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9. 濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時(shí)每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10. 終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
相關(guān)產(chǎn)品:
人載脂蛋白A4(apo-A4)ELISA試劑盒 15.6-1000 pg/mL
人抗頂體蛋白抗體(ACR)ELISA試劑盒 0.156-10 ng/mL
人晚期糖基化終末產(chǎn)物受體(RAGE/AGER)ELISA試劑盒 0.312-20 ng/mL
人5-羥色胺-N-乙酰基轉(zhuǎn)移酶(AA-NAT)ELISA試劑盒 0.78-50 ng/mL
使用方法:
測(cè)定法的靈敏度來自作為報(bào)告的酶。酶是一種有機(jī)催化劑,很少量的酶即可誘導(dǎo)大量的催化反應(yīng),產(chǎn)生可供觀察的顯色反應(yīng)現(xiàn)象。因此該體系常被稱為酶放大體系。
1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。 24μg/ml 5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
12μg/ml 4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
6μg/ml 3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
3μg/ml 2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
1.5μg/ml 1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
2. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測(cè)樣品10μl。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。|
3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4. 配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。
7. 溫育:操作同3。
8. 洗滌:操作同5。
9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
11. 測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
鈷柱介質(zhì) 10mL Co-Agarose Resin 4℃保存
天凈沙鎳柱原位再生試劑盒 20次 Ni-Agarose Column In-Place Recharge Kit 4℃保存
兔抗His標(biāo)簽多抗,HRP標(biāo)記 100µL Anti His-tag PAb,HRP-Labeled 4℃保存
一站式GST標(biāo)記蛋白質(zhì)微量純化套裝(超聲破碎細(xì)胞) 20次 One-Stop GST-Tagged Protein Miniprep Pack 介質(zhì)需4℃保存,、Benzonase和PMSF需-20℃保存
一站式GST標(biāo)記蛋白質(zhì)微量純化套裝(酶溶破細(xì)胞) 20次 One-Stop GST-Tagged Protein Miniprep Pack 介質(zhì)需4℃保存,、Benzonase和PMSF需-20℃保存
瓊脂糖 2mL Glutathione Agarose 4℃保存,切勿冷凍
L-(還原型) 5g Glutathione 4℃保存
兔抗GST標(biāo)簽多抗 20µL Anti GST-Tag Rabbit PAb -20℃保存
HRP標(biāo)記的兔抗GST標(biāo)簽多抗 20µL Anti GST-Tag Rabbit PAb,HRP -20℃保存
一站式MBP標(biāo)簽蛋白純化套裝 20次 One-Stop MBP-Tagged Protein Miniprep Pack 介質(zhì)需4℃保存,PMSF需-20℃保存
人分泌型卷曲相關(guān)蛋白4ELISA試劑盒小鼠脈絡(luò)膜血管細(xì)胞培養(yǎng)基厚垣孢普可尼亞菌 Pochonia chlamydosporia
唾液桿菌水楊素亞種 Lactobacillus salivarius subsp. saliciniusHT-1080(人纖維肉瘤細(xì)胞)
土芽胞桿菌 Sporolactobacillus terrae粟酒裂殖酵母 Schizosaccharomyces pombe
BPH-1, 人前列腺增生細(xì)胞香菇 Lentinula edodes
冬克青霉 Penicillium donkii Stolk人直結(jié)腸平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基
三葉草根瘤菌 Rhizobium trifolii人小腸粘膜上皮細(xì)胞培養(yǎng)基
Streptavidin-HRP(Ready to Use)/Streptavidin-HRP(IHC工作液)洛格酵母 Saccharomyces logos
植物桿菌 Lactobacillus plantarum喜鹽芽胞桿菌 Halobacillus sp.
香菇 Lentinula edodesGH3, 大鼠垂體生激素腺瘤
人胃細(xì)胞異常漢遜酵母 Hansenula anomala