詳細(xì)介紹
使用方法:
測(cè)定法的靈敏度來(lái)自作為報(bào)告的酶。酶是一種有機(jī)催化劑,很少量的酶即可誘導(dǎo)大量的催化反應(yīng),產(chǎn)生可供觀察的顯色反應(yīng)現(xiàn)象。因此該體系常被稱為酶放大體系。
1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。 24μg/ml 5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
12μg/ml 4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
6μg/ml 3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
3μg/ml 2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
1.5μg/ml 1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
2. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測(cè)樣品10μl。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。|
3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4. 配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。
7. 溫育:操作同3。
8. 洗滌:操作同5。
9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
11. 測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
服務(wù):
我們可以根據(jù)您的應(yīng)用需要,比如在檢測(cè)范圍、種屬以及靈敏度等方面有特殊要求,而量身定制檢測(cè)試劑盒,有效控制檢測(cè)試劑成本。并可提供免費(fèi)代測(cè)。僅供科研實(shí)驗(yàn)。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 規(guī)格 |
人Atonal同源物1ELISA試劑盒 | ATOH1 ELISA Kit | 48T/96T |
試劑盒組成及試劑配制 :
1. 酶聯(lián)板(Assay plate ):一塊(96孔)。
2. 標(biāo)準(zhǔn)品(Standard):2瓶(凍干品)。
3. 樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4. 標(biāo)記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5. 辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6. 標(biāo)記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7. 辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8. 底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9. 濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時(shí)每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10. 終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
相關(guān)產(chǎn)品:
多瘤病毒(BK) 核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針?lè)? 0.156-10 ng/mL
副溶血性弧菌(VP)核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針?lè)? 15.6-1000 U/L
霍亂弧菌(VC)核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針?lè)? 15.6-1000 U/L
霍亂弧菌(O1)核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針?lè)? 0.312-20 ng/mL
樣品準(zhǔn)備:
1)血清-----操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2)血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測(cè)。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
3)細(xì)胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4)組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液
5)保存------如果樣品不立即使用,應(yīng)將其分成小部分-70 ℃保存,避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測(cè)前先離心或過(guò)濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
電泳級(jí)TEMED 1.5mL TEMED,EG 4℃保存(長(zhǎng)期保存可放-20℃)、避光
電泳級(jí)過(guò)硫酸銨 0.1g×10 Ammonium Persulfate,EG 常溫,防潮
電泳級(jí)尿素 100g Urea,EG 常溫
電泳級(jí)MOPS 100g MOPS,EG 常溫
剝離硅烷 50mL Repeling Silane 常溫
親和硅烷 25mL Binding Silane 常溫
電泳級(jí)甘油 100mL Glycerol,EG 常溫
電泳級(jí)二甲苯藍(lán)FF溶液 10mL Xylene Cyanol Solution,EG 常溫密封干燥避光保存
電泳級(jí)溴酚藍(lán)溶液 10mL Bromophenol Blue Solution,EG 常溫避光干燥保存
電泳級(jí)橙黃G溶液 10mL Orange G Solution,EG 常溫,避光干燥保存
人Atonal同源物1ELISA試劑盒頂青霉 Penicillium corylophilium中性(含100mL酶解緩沖液)
指狀青霉 Penicillium digitatum小鼠子宮平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基
人白血病耐藥株皮狀絲孢酵母 Trichosporon cutaneum
棲土曲霉 Aspergillus terricola費(fèi)氏中華根瘤菌 Sinorhizobium fredii
靈芝 Ganoderma lucidiumNCI-H1975(人肺腺細(xì)胞)
Poly-L-Lysine Solutiona(5mg/ml)宇佐美曲霉變種 Aspergillus usamii var.
大鼠氣管和支氣管上皮細(xì)胞培養(yǎng)基間型酒香酵母 Brettanomyces intermedius
淡紫擬青霉 Paecilomyces lilacinus小鼠皮下結(jié)締組織細(xì)胞
HUVEC, 人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞大鼠主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基
蘇云金芽孢桿菌庫(kù)爾斯塔克亞種 Bacillus thuringiensis subsp. Kurstaki狀葡萄球菌狀亞種 Staphylococcus capitis subsp. capitis