詳細(xì)介紹
運(yùn)輸及保存:低溫運(yùn)輸,-20℃保存,有效期一年。使用本試劑盒提供的陽(yáng)性對(duì)照時(shí),由于其濃度較高,一定要注意不要污染其他試劑和成分。在專門的區(qū)域操作。本試劑盒不但準(zhǔn)確、快速、靈敏,還具有以下
產(chǎn)品名稱 | 球孢子菌通用進(jìn)口PCR試劑 |
英文名稱 | Coccidioidesspp.PCR |
分類 | PCR檢測(cè)試劑盒 |
特點(diǎn):
1. 即開(kāi)即用,用戶只需要提供樣品 DNA 模板,操作簡(jiǎn)單。
2. 預(yù)期的 PCR 產(chǎn)物長(zhǎng)度為 494 bp。
3. 本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長(zhǎng)度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過(guò)多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數(shù)第二個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列有適宜的酶切位點(diǎn), 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無(wú)明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。
子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2(ABCC3)ELISA Kit Human Canalicular multispecific organic anion transporter 2,ABCC3 ELISA kit
人微管多特異性有機(jī)陰離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1(xycorticosterone,DOC ELISA Kit
人脫氧尿三磷酸(DUTP)ELISA Kit Human deoxyuridinetriphate,DUTP ELISA Kit
人脫氫表雄酮硫酸酯(DHEA-S)ELISA Kit Human Dehydroepiandrosterone sulfate,DHEA-S ELISA Kit
人脫-γ-羧基凝血酶原(DCP)ELISA Kit Human des-gamma-carboxy-prothrombin,DCP ELISA Kit
人突觸泡蛋白抗體(SYV IgG)ELISA Kit Human anti-parainfluenza virus(PIV)antibody(IgG)ELISA kit
人抗父體淋巴細(xì)胞毒性抗體(APCA)ELISA Kit Human anti-paternal cytotoxic antibody,APCA ELISA Kit
人抗肺泡基底膜抗體(ABISman anti-SSA/Ro antibody ELISA Kit
人抗sp100抗體(sp100)ELISA Kit Human anti-sp100-antibody ELISA Kit
人抗Smith抗體(Sm)ELISA Kit Human anti-Smith antibody ELISA Kit
人抗Scl-70抗體ELISA Kit Human anti-Scl-70 antibody ELISA Kit
人抗Sa抗體(anti-Sa-Ab)ELIS
氨酸激酶c-Abl抗體 SDF-1β/SDF1B ELISA Kit 基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1β(SDF-1β/SDF1B)ELISA試劑盒
卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白152抗體 SDF-1β/CXCL12 ELISA Kit 基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1β(SDF-1β/CXCL12)ELISA試劑盒
甘油二酯膽堿磷酸轉(zhuǎn)移酶抗體 SDF-1β ELISA Kit 基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1β(SDF-1β)ELISA試劑盒
嗜鉻粒素B抗體 SDF-1α ELISA Kit 基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1α(SDF-1α)ELISA試劑盒
血管加壓素激活鈣啟動(dòng)受體蛋白1抗體 SDF-1a/CXCL12 ELISA Kit 基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1a(SDF-1a/CXCL12)ELISA試劑盒
細(xì)胞色素P450Ⅱj3抗體 SDF1A ELISA Kit 基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1a(SDF1A)ELISA試劑盒
鈣激活氯離子通道4抗
球孢子菌通用進(jìn)口PCR試劑A Kit Human anti-Sa-antibody ELISA Kit
人抗Mi2抗體(anti-Mi2-Ab)ELISA Kit Human anti-Mi2-antibody ELISA Kit
人抗M2膽堿能受體抗體ELISA Kit Human anti-M2-cholinergic receptor antibodies ELISA Kit
人抗Ku抗體(anti-Ku-Ab)ELISA Kit
Q-PCR技術(shù):
實(shí)時(shí)熒光定量PCR(real-time quantitative PCR)/QRT-PCR,是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光標(biāo)記物,利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程,后通過(guò)擴(kuò)增曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。熒光定量PCR不僅實(shí)現(xiàn)真正實(shí)現(xiàn)了定量,而且具有靈敏度和特異性、高能實(shí)現(xiàn)多重反應(yīng)、自動(dòng)化程度高、無(wú)污染、實(shí)時(shí)和準(zhǔn)確等特點(diǎn)。
熒光定量PCR所使用的熒光基團(tuán)可分為兩種:熒光探針和熒光染料。
1.使用SYBR熒光染料法來(lái)進(jìn)行熒光定量PCR時(shí),我們首先在PCR反應(yīng)體系中加入過(guò)量SYBR熒光染料。SYBR熒光染料特異性地?fù)饺隓NA雙鏈后發(fā)射一定量的熒光信號(hào),而不摻入鏈中的SYBR染料分子不會(huì)發(fā)射熒光信號(hào),從而保證熒光信號(hào)的增加與PCR產(chǎn)物的增加*同步。
2.Taqman探針則是利用探針與模板的特異性結(jié)合的特點(diǎn),以及探針內(nèi)熒光報(bào)告基團(tuán)和淬滅基團(tuán)的分子特性來(lái)實(shí)現(xiàn)對(duì)PCR進(jìn)行定量檢測(cè)。這種方法可以實(shí)現(xiàn)高靈敏度,嚴(yán)格針對(duì)特定堿基序列的定量實(shí)驗(yàn)。