詳細介紹
運輸及保存:低溫運輸,-20℃保存,有效期一年。使用本試劑盒提供的陽性對照時,由于其濃度較高,一定要注意不要污染其他試劑和成分。在專門的區域操作。本試劑盒不但準確、快速、靈敏,還具有以下
產品名稱 | 新生隱球菌PCR試劑免費代測 |
英文名稱 | Cryptococcus neoformansPCR |
分類 | PCR檢測試劑盒 |
特點:
1. 即開即用,用戶只需要提供樣品 DNA 模板,操作簡單。
2. 預期的 PCR 產物長度為 494 bp。
3. 本產品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
反應五要素:
參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現非特異條帶。ATGC隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內部出現二級結構,避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數第二個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數據庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量產生所需要的結果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。
95 IFITM1/CD225/IFI17 ELISA Kit 干擾素誘導跨膜蛋白1(IFITM1/CD225/IFI17)ELISA試劑盒
20號染色體開放閱讀框187抗體 IP-10/CXCL10 ELISA Kit 干擾素誘導蛋白10(IP-10/CXCL10)ELISA試劑盒
21號染色體開放閱讀框59抗體 ITAC/CXCL11 ELISA Kit 干擾素誘導T細胞趨化因子(ITAC/CXCL11)ELISA試劑盒
20號染色體開放閱讀框152抗體 IRF8 ELISA Kit 干擾素調節因子8(IRF8)ELISA試劑盒
20號染色體開放閱讀框165抗體 IRF3 ELISA Kit 干擾素調節因子3(IRF3)ELISA試劑盒
20號染色體開放閱讀框166抗體 IRF ELISA Kit 干擾素調節因子(IRF)ELISA試劑盒
20號染色體開放閱讀框173抗體 Ifi205 ELISA Kit 干擾素活化基因205(Ifi205)ELISA試劑盒
20號染色體開放閱讀框24抗體 Anti-IFN-ab ELISA Kit 干擾素a-抗體(Anti-IFN-ab)ELISA試劑盒
20號染色體開放閱讀框30抗體 BIRC2/3 ELISA Kit 桿狀病毒IAP重復包含蛋白2/3(BIRC2/3)ELISA試劑盒
20號染色體開放閱讀框4抗體 HL ELISA Kit 肝脂酶(HL)ELISA試劑盒
20號染色體開放閱讀框7抗體 L-FA
Kit Human PEPD ELISA Kit
人脯氨酸羥化酶(PHD)ELISA Kit Human PHD ELISA Kit
人脯氨酸/谷氨酰銨富含性剪接因子(SFPQ)ELISA Kit Human SFPQ ELISA Kit
人封閉蛋白4(CLDN4)ELISA Kit Human CLDN4 ELISA Kit
人分泌型卷曲相關蛋白5(SFRP5)ELISA Kit Human SFRP5 ELISA Kit
新生隱球菌PCR試劑免費代測人分泌型卷曲相關蛋白4(SFRP4)EL
BP ELISA Kit 肝臟型脂肪酸結合蛋白(L-FABP)ELISA試劑盒
20號染色體開放閱讀框79抗體 HTGL ELISA Kit 肝臟甘油三脂脂肪酶(HTGL)ELISA試劑盒
20號染色體開放閱讀框94抗體 L-FAB
Q-PCR技術:
實時熒光定量PCR(real-time quantitative PCR)/QRT-PCR,是指在PCR反應體系中加入熒光標記物,利用熒光信號積累實時監測整個PCR進程,后通過擴增曲線對未知模板進行定量分析的方法。熒光定量PCR不僅實現真正實現了定量,而且具有靈敏度和特異性、高能實現多重反應、自動化程度高、無污染、實時和準確等特點。
熒光定量PCR所使用的熒光基團可分為兩種:熒光探針和熒光染料。
1.使用SYBR熒光染料法來進行熒光定量PCR時,我們首先在PCR反應體系中加入過量SYBR熒光染料。SYBR熒光染料特異性地摻入DNA雙鏈后發射一定量的熒光信號,而不摻入鏈中的SYBR染料分子不會發射熒光信號,從而保證熒光信號的增加與PCR產物的增加*同步。
2.Taqman探針則是利用探針與模板的特異性結合的特點,以及探針內熒光報告基團和淬滅基團的分子特性來實現對PCR進行定量檢測。這種方法可以實現高靈敏度,嚴格針對特定堿基序列的定量實驗。